公开(公告)号
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CN1330667C
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公开(公告)日
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2007.08.08
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申请(专利)号
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CN03817332.8
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申请日期
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2003.07.28
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专利名称
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分离肠胆固醇结合蛋白的方法
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主分类号
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C07K14/47(2006.01)I
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分类号
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C07K14/47(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P9/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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2002.8.6 EP 02017504.8
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申请(专利权)人
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塞诺菲-安万特德国有限公司
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发明(设计)人
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W·克拉默;W·弗里克
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地址
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德国法兰克福
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颁证日
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国际申请
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2003-07-28 PCT/EP2003/008290
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进入国家日期
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2005.01.20
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专利代理机构
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北京市中咨律师事务所
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代理人
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黄革生;隋晓平
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国省代码
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德国;DE
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主权项
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可通过下述方法获得的纯化的145kDa的蛋白,该方法包括:a]提供肠细胞,b]将来自a]的肠细胞与光敏的化合物2-氮杂环丁烷酮共同孵育,所述2-氮杂环丁烷酮被放射标记并且能够与所述蛋白特异性结合,c]将所述肠细胞溶解并去除细胞碎片,d]将上清液加至含有小麦胚芽凝集素琼脂糖的装置上,e]将来自d]的小麦胚芽凝集素琼脂糖的洗脱液上样于羟基磷灰石柱上,f]将来自e]的放射标记部分上样于制备性SDS-PAGE上,g]收集放射标记部分且可能沉淀;或者所述方法包括:a]制备肠细胞,b]将来自a]的肠细胞与光敏的胆固醇吸收抑制剂共同孵育,所述胆固醇吸收抑制剂被放射标记或生物素标记,c]将来自b]的肠细胞溶解并去除细胞碎片,d]将上清液置于链霉抗生物素-琼脂糖上,e]将洗脱液置于SDS-PAGE上,f]分离、洗脱并且可能再折叠的大小为140-150kDa的蛋白。
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摘要
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本发明描述了分离能够结合胆固醇和/或胆固醇吸收抑制剂的肠蛋白的方法。
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国际公布
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2004-02-19 WO2004/014947 英
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