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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:修饰的核酸序列以及增加细胞系统中mRNA水平和蛋白质表达的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

修饰的核酸序列以及增加细胞系统中mRNA水平和蛋白质表达的方法

公开(公告)号 CN1325646C  
公开(公告)日 2007.07.11  
申请(专利)号 CN98810400.8  
申请日期 1998.10.20  
专利名称 修饰的核酸序列以及增加细胞系统中mRNA水平和蛋白质表达的方法  
主分类号 C12N15/30(2006.01)I  
分类号 C12N15/30(2006.01)I;C12N15/67(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C07K14/445(2006.01)I;A01K67/027(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权 1997.10.20 US 60/062,592;1998.5.15 US 60/085,649  
申请(专利权)人 GTC生物治疗学公司  
发明(设计)人 L·H·陈;H·米德  
地址 美国马萨诸塞州  
颁证日  
国际申请 1998-10-20 PCT/US1998/022225  
进入国家日期 2000.04.20  
专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所  
代理人 周中琦  
国省代码 美国;US  
主权项 在非人转基因哺乳动物的乳汁中产生寄生物蛋白或其片段的方法,其包含:提供非人转基因哺乳动物,其基因组包含与定向乳腺表达的启动子有效连接的编码所述寄生物蛋白或其片段的修饰的核酸序列,其中的修饰的核酸序列经下述方式被修饰:a)将所述的寄生物蛋白或其片段的编码序列在寄生物中天然存在的至少一部分AUUUA mRNA不稳定性基序置换为用于表达的哺乳动物细胞优选的密码子,以去除所述的AUUUA mRNA不稳定性基序或防止所述的AUUUA mRNA不稳定性基序使编码所述寄生物蛋白或其片段的mRNA不稳定,同时与被置换的所述的AUUUA mRNA不稳定性基序部分编码相同的基酸;b)将所述的被修饰核酸序列在寄生物中天然存在的一个或多个含AT的密码子置换为用于表达的哺乳动物细胞优选的并且与所述被置换的密码子编码相同的氨基酸的密码子;c)使所述非人转基因哺乳动物在其乳汁中表达所述的寄生物蛋白或其片段,从而产生所述的寄生物蛋白或其片段,并且其中编码所述的寄生物蛋白或其片段的天然存在的核酸序列包含至少一个AUUUA不稳定性基序。  
摘要 本发明提供了修饰的重组核酸序列(优选的是DNA)以及增加蛋白质的mRNA水平和蛋白质表达的方法,这里的蛋白质是已知或很可能在细胞培养系统、哺乳动物细胞培养系统或转基因动物中难以表达的蛋白质。使用本发明重组技术表达的优选的“困难”蛋白质候选物是从优选是诸如寄生生物、细菌和病毒等低等生物的异源细胞衍生的蛋白质。它们的DNA编码序列相对使用的重组表达系统而言含有高的总AT含量或富AT区和/或mRNA不稳定基序和/或稀有密码子。  
国际公布 1999-04-29 WO1999/020766 英  
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