公开(公告)号
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CN1319988C
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公开(公告)日
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2007.06.06
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申请(专利)号
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CN200410067157.2
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申请日期
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2004.10.14
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专利名称
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一种高亲和力免疫球蛋白结合分子及其制备方法
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主分类号
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C07K14/00(2006.01)I
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分类号
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C07K14/00(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;C07K14/315(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;G01N33/535(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海润龙生物科技有限公司
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发明(设计)人
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潘 卫;徐 容;王金华;谢天培;李云华;王德贵;沈毅珺;扬 华;王锦红;许浩坤
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地址
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200065上海市普陀区延长西路25号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海光华专利事务所
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代理人
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余明伟;沈锡英
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种重组Ig结合分子文库,其特征在于:所述文库是由以不同的Ig结合分子葡萄球菌A蛋白的A、B、C、D、E结构域,大消化链球菌L蛋白的B1、B2、B3、B4、B5结构域,G群或C群链球菌G蛋白的G1、G2结构域的单个抗体结合结构域为结构单元,以结构单元随机DNA重排形成的Ig结合分子组成,其中上述结构域的核苷酸序列分别为:SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:12,单个结构域之间以核苷酸GAGCTC连接,结构单元随机DNA重排形成的Ig结合分子通过如下方法获得:(1)将Ig结合分子葡萄球菌A蛋白的A、B、C、D、E结构域,大消化链球菌L蛋白的B1、B2、B3、B4、B5结构域,G群或C群链球菌G蛋白的G1、G2结构域的单个抗体结合结构域分别经PCR扩增引入Sac I酶切位点作为连接点;(2)将PCR回收产物分别经Sac I酶切消化;(3)将步骤(2)获得的Sac I酶切消化产物混合,用T4连接酶将各单结构域进行随机连接重组。
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摘要
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本发明涉及一种重组免疫球蛋白结合分子文库、其制备方法及其应用。本发明是以来自不同种属免疫球蛋白结合分子葡萄球菌A蛋白protein A的A、B、C、D、E结构域、大消化链球菌proteinL的B1、B2、B3、B4、B5结构域、C和G群链球菌蛋白G protein G的G1、G2为结构单元,将上述结构单元随机连接,构建重组Ig结合分子文库,将该文库展示在噬菌体表面;以免疫球蛋白对噬菌体展示重组Ig结合分子文库进行3-4轮亲和筛选,获得系列高亲和力免疫球蛋白结合分子噬菌体文库。上述文库可用于筛选高亲和力Ig结合分子。
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国际公布
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