公开(公告)号
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CN1318448C
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公开(公告)日
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2007.05.30
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申请(专利)号
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CN200510059313.5
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申请日期
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2005.03.28
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专利名称
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一种重组全长人脑红素、其生产方法及其应用
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主分类号
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C07K14/795(2006.01)I
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分类号
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C07K14/795(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P25/00(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所;北京苏里曼医药科技有限公司
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发明(设计)人
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张成岗;王利红;高 艳;王春丽
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地址
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100850北京市海淀区太平路27号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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北京纪凯知识产权代理有限公司
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代理人
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鲁 兵
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种重组全长人脑红素rhNGB的生产方法,具体步骤包括:将工程菌接种培养、细菌反复冻融、菌体裂解、包涵体裂解、层析纯化和目的蛋白复性;其中,所述工程菌为重组pBV220-rhNGB/HB101工程菌;所述工程菌接种培养基为含有100μg/ml氨苄青霉素的LB;所述包涵体裂解步骤中将所述包涵体冰浴超声破碎后,于100℃煮沸5min。
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摘要
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本发明公开了一种细菌表达生产重组全长人脑红素rhNGB的方法以及用该方法得到的重组全长人脑红素rhNGB,该方法包括将工程菌接种培养、细菌反复冻融、菌体裂解、包涵体裂解、层析纯化和目的蛋白复性等步骤。本发明是在构建人脑红素基因片段NSV并构建高效表达菌株的基础上,建立了一整套工程菌诱导表达、包涵体分离裂解、蛋白质复性纯化的工艺,从而获得了重组全长人脑红素纯品,并对重组全长入脑红素的生物学活性进行描述。实验表明本发明得到的全长人脑红素可以作为药物用于预防和治疗中枢和外周神经系统疾病。
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国际公布
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