| 公开(公告)号 | CN1316042C |
| 公开(公告)日 | 2007.05.16 |
| 申请(专利)号 | CN200510031487.0 |
| 申请日期 | 2005.04.26 |
| 专利名称 | 基因mRNA的定量检测系统和检测方法 |
| 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 湖南大学 |
| 发明(设计)人 | 王柯敏;谭蔚泓;刘 斌;李 军;王 炜 |
| 地址 | 410082湖南省长沙市河西岳麓山湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 湖南兆弘专利事务所 |
| 代理人 | 赵 洪 |
| 国省代码 | 湖南;43 |
| 主权项 | 一种基因mRNA表达定量检测方法，其特征在于基因表达定量检测的步骤为：(1).构建分子信标与RNA标准品杂交的荧光标准曲线：利用T7体外转录试剂盒通过体外转录技术合成与分子信标探针互补的靶RNA分子，取过量的分子信标与不同浓度的靶RNA分子在杂交缓冲液中混合，在37℃温育4～6小时，检测并记录杂交前后荧光强度的变化，以体外合成的靶RNA浓度为横坐标，以分子信标与RNA杂交后的荧光信号变化值为纵坐标作图，建立RNA浓度与荧光信号变化的杂交标准曲线；(2).提取不同材料的总RNA并定量测定后，在10mM Tris-HCl，pH 8.0，3mM MgCl2杂交缓冲液中加入浓度为25nM的分子信标、一定量样品总RNA，在37℃温育，检测并记录荧光强度的变化；(3).利用建立的杂交荧光标准曲线，计算出与杂交后的荧光信号变化值对应的靶RNA浓度，以每微克样品含靶RNA的摩尔数表示。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种基因mRNA表达水平定量检测的分析技术。该检测系统由标准品RNA，分子信标核酸探针和RNA检测样品在相应的杂交缓冲溶液中组成。本检测技术能定量检测经基因转染、药物处理、基因干扰等各种处理的细胞或组织样品的基因表达水平，在生命科学与医学研究领域具有重要的科学实用价值和广阔的市场前景。 |
| 国际公布 |
