| 公开(公告)号 | CN1305895C |
| 公开(公告)日 | 2007.03.21 |
| 申请(专利)号 | CN200410002607.X |
| 申请日期 | 2004.01.13 |
| 专利名称 | 混合酸酐法合成胸腺五肽的方法 |
| 主分类号 | C07K1/06(2006.01)I |
| 分类号 | C07K1/06(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 兰州凯博生物化学技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 达朝山;刘大学 |
| 地址 | 730010甘肃省兰州市高新技术产业开发区创业服务中心(张苏滩575号) |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 甘肃省专利服务中心 |
| 代理人 | 张克勤 |
| 国省代码 | 甘肃;62 |
| 主权项 | 一种混合酸酐法合成胸腺五肽的方法，过程有二肽合成—三肽合成—四肽合成—五肽合成—粗品生成；其特征在于：以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸乙酯为活化剂，活化被保护的氨基酸形成高反应活性的混合酸酐，与氨基端裸露的氨基酸或肽反应来合成胸腺五肽；各肽合成中均采用N-甲基吗啉为催化剂，氯甲酸乙酯为活化剂，各肽合成过程包括混合酸酐的生成—过滤—减压浓缩—酸碱洗涤—干燥除水—各肽生成—脱保护基的过程，合成五肽后，脱掉保护基团，生成粗品胸腺五肽，再纯化；所述被保护的氨基酸按各肽合成顺序是酪氨酸酯与缬氨酸的混合酸酐反应得到二肽、天门冬氨酸的混合酸酐与二肽反应得到三肽、赖氨酸的混合酸酐与三肽反应得到四肽、精氨酸的混合酸酐与四肽反应得到五肽粗品，所用氨基酸的2-氨基都采用叔丁氧甲酰基(Boc)保护，精氨酸的2-氨基由叔丁氧甲酰基(Boc)或苄氧甲酰基(Cbz)保护，天门冬氨酸的侧链羧基采用苄酯保护，赖氨酸的侧链氨基用2-氯苄氧甲酰基保护，精氨酸的侧链胍基用硝基保护，酪氨酸的酚羟基用苄基保护，羧基用酯基保护；减压浓缩—酸碱洗涤—干燥除水过程为：减压浓缩干后加入乙酸乙酯，分别用稀盐酸、碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥；脱保护基过程为，加入三氟乙酸脱除叔丁氧甲酰基(Boc)保护基团，减压浓缩后加入有机溶剂溶解，有机溶剂可以是二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯，用冷的氢氧化钠洗涤有机溶剂，再用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥后浓缩，再用四氢呋喃或N，N-二甲基甲酰胺溶剂溶解并冷藏备用；所述粗品生成是指合成五肽后，用氟化氢切割—皂化或用催化氢化—三氟乙酸化—皂化脱掉所有保护基团；在粗品生成后的纯化过程为，用制备性高压液相色谱纯化，得到胸腺五肽水溶液，然后冷冻干燥；混合酸酐的生成过程中的反应温度为-10～-15℃；各肽合成过程中的反应温度为-15～0℃。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种混合酸酐法液相合成胸腺五肽的方法，它解决了目前胸腺五肽生产中存在的不能大规模合成胸腺五肽的技术问题。其合成过程有二肽合成-三肽合成-四肽合成-五肽合成-粗品生成；它是以N-甲基吗啉为催化剂，采用氯甲酸乙酯为活化剂，活化被保护的氨基酸形成高反应活性的混合酸酐，与氨基端裸露的氨基酸或肽反应来合成胸腺五肽；各肽合成过程包括混合酸酐的生成-过滤-减压浓缩-酸碱洗涤-干燥除水-各肽生成-脱保护基的过程，合成五肽后，脱掉保护基团，生成粗品胸腺五肽，再纯化；本发明的合成过程，避免使用任何昂贵的接肽缩合试剂；最终产物纯度高，兼具液相与固相合成法的中间产物最小程度纯化和易形成规模化生产的优点。 |
| 国际公布 |
