| 公开(公告)号 | CN1299764C |
| 公开(公告)日 | 2007.02.14 |
| 申请(专利)号 | CN200310115937.5 |
| 申请日期 | 2003.12.16 |
| 专利名称 | 脂质体内皮抑素的制备方法 |
| 主分类号 | A61K38/17(2006.01)I |
| 分类号 | A61K38/17(2006.01)I;A61K47/24(2006.01)I;A61K9/12(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院长春应用化学研究所 |
| 发明(设计)人 | 王 群 |
| 地址 | 130022吉林省长春市人民大街5625号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 吉林;22 |
| 主权项 | 一种脂质体内皮抑素的制备方法，将溶于氯仿的磷脂酰胆碱、胆固醇、磷脂酰丝氨酸和硬脂酸胺按摩尔比为15～20∶15～20∶2～5∶0.5～1.5混合，在36～40℃下减压旋转蒸发4～6h，旋转速度为80～120rpm，形成一薄层脂膜，以氮气流除尽残余痕量有机溶剂，加入2mL H2O继续以120rpm旋转溶解下脂膜，在20～25℃下浴式超声10～15min，形成多囊脂质体，室温下静置孵育1～2h，冰浴中进行探针超声6～10次，每次0.5min，每次间隔0.5～1min，悬液静置孵育2～3h，8000rpm离心10min，取上清液小单层脂质体，以0.22μm膜除菌过滤后，同4mg/mL内皮抑素溶液等体积混合，内皮抑素是通过基因工程方法在大肠杆菌中表达并经Ni-NTA Sepharose亲和层析柱纯化的重组人内皮抑素蛋白，加入脂质体冻干保护剂，冻干保护剂为6～8％海藻糖、0.6～0.8％明胶、0.5-1％人血清白蛋白、1.5～2％山梨醇、1％谷氨酸钠、1％尿素、0.5％抗坏血酸和0.2％L-精氨酸，在-45℃冷冻干燥8～10h，收获内皮抑素脂质体。 |
| 摘要 | 本发明属于脂质体内皮抑素的制备方法。结合旋转蒸发和冷冻干燥方法制备的内皮抑素脂质体粒径大小在150nm～180nm，蛋白包裹率是35～42％。在冻干状态下，内皮抑素脂质体在-20℃可以保存12个月，在4～8℃可以保存6个月，在20～25℃可以保存2个月。在内皮抑素脂质体重新水合形成胶体溶液时，在4～8℃稳定期为6d，在20～25℃稳定期为60h。该脂质体具有稳定性好、蛋白包裹率高、粒径大小均匀、操作简单、适合工业化大批量生产的优点。 |
| 国际公布 |
