公开(公告)号
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CN1295330C
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公开(公告)日
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2007.01.17
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申请(专利)号
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CN200510038289.7
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申请日期
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2005.01.25
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专利名称
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抗病毒活性重组鸡γ-干扰素rChIFN-γ的制取方法及用途
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主分类号
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C12N15/09(2006.01)I
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分类号
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/23(2006.01)I;A61K38/21(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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扬州大学
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发明(设计)人
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秦爱建;许金俊;孔桂美;刘岳龙;金文杰
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地址
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225009江苏省扬州市大学南路88号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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扬州市锦江专利事务所
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代理人
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江 平
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国省代码
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江苏;32
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主权项
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抗病毒活性重组鸡γ-干扰素rChIFN-γ的制取方法,其特征在于由以下步骤组成:a、将ChIFN-γ基因从真核质粒pcDNA-ChIFN-γ中用EcoR I和Not I双酶切后克隆到转移载体pFASTBAC1中,获得重组转移质粒pFASTBAC1-ChIFN-γ;b、取DH10Bac感受态细胞,加入1ng pFASTBAC1-ChIFN-γ,转座后,用SOC培养基10倍梯度稀释培养物,各取100μl涂布Luria平板,37℃培养24~48小时,挑取白色菌落,Luria平板进行四次筛选纯化,阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ,提取出阳性质粒DNA用于下一步转染;c、取上述阳性质粒Bacmid-ChIFN-γDNA转染Sf9细胞。
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摘要
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抗病毒活性重组鸡γ-干扰素的制取方法及用途,涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN-γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中,获得重组转移质粒pFASTBACl-ChIFN-γ;取DH10Bac感受态细胞,加入1ng pFASTBACl-ChIFN-γ,转座后,用SOC培养基稀释培养物,涂布Luria平板,培养后,挑取白色菌落,Luria平板进行纯化,阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ,提取阳性质粒DNA;取上述阳性质粒DNA转染Sf9细胞,制得高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。
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国际公布
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