公开(公告)号
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CN1292794C
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公开(公告)日
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2007.01.03
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申请(专利)号
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CN03152830.9
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申请日期
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2003.08.22
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专利名称
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嗜水气单胞菌中溶血素的免疫刺激复合物的制备工艺
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主分类号
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A61K39/02(2006.01)I
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分类号
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A61K39/02(2006.01)I;A61K39/39(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所;方勤美;龚 晖;林天龙
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发明(设计)人
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方勤美;龚 晖;林天龙
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地址
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350003福建省福州市五四北路247号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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福州展晖专利事务所
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代理人
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林天凯
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国省代码
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福建;35
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主权项
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嗜水气单胞菌中溶血素的免疫刺激复合物的制备工艺,其特征在于,具有如下步骤:(1)提供一种嗜水气单胞菌菌株,(2)在培养基中对该菌株进行扩大培养而得培养液,(3)从培养液中提取毒素,①提供一种离心机,②在离心机中对培养液离心后得上清液,③用饱和硫酸铵处理上清液于离心机中离心后取沉淀,④将沉淀溶用PBS重悬,并透析,获取悬液即为毒素,(4)依如下顺序制备免疫刺激复合物,①将毒素浓缩至1~3mg/ml后第一次加有机酸处理1~3h,②加入Mega-10至终浓度为2%,在37℃下处理4h,③加入Quil A佐剂至终浓度为0.05~0.2%,④加入胆固醇、卵磷脂至终浓度为125μg/mL而得组合物,(5)第二次加有机酸处理组合物后透析4h,再用0.01M PBS透析72h,获取悬液即为免疫刺激复合物。
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摘要
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本发明涉及分子生物学和免疫学领域,特别涉及一种嗜水气单胞菌中溶血素的免疫刺激复合物的制备工艺,步骤为:将嗜水气单胞菌菌株培养而得培养液;培养液离心后得上清液,用饱和硫酸铵处理上清液,离心后取沉淀用PBS重悬、透析,获取悬液即为毒素;将毒素浓缩至1~3mg/ml后加入有机酸处理1~3h,加入Mega-10至终浓度2%,37℃处理4h,加入QuilA佐剂至终浓度0.05~0.2%,加入胆固醇、卵磷脂至终浓度125μg/mL,用有机酸处理后透析4h,获取悬液即为免疫刺激复合物。该免疫刺激复合物的免疫效果稳定,增效显著,可产生强烈而持久的免疫应答,使受免疫动物产生坚强的免疫保护力而不受刺激。
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国际公布
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