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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:SARS冠状病毒RNA磁性捕获方法及应用该方法的PCR检测专利检索:专利号/专利人/发明人
    

SARS冠状病毒RNA磁性捕获方法及应用该方法的PCR检测

公开(公告)号 CN1289692C  
公开(公告)日 2006.12.13  
申请(专利)号 CN200410047959.7  
申请日期 2004.06.14  
专利名称 SARS冠状病毒RNA磁性捕获方法及应用该方法的PCR检测  
主分类号 C12Q1/68(2006.01)I  
分类号 C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 蔡剑平  
发明(设计)人 蔡剑平;黑爱  
地址 100054北京市丰台区草桥东路16-4022  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 北京德琦知识产权代理有限公司  
代理人 王 琦;宋志强  
国省代码 北京;11  
主权项 一种SARS冠状病毒RNA的捕获方法,该方法包括如下的步骤:1)清洗表面包被有亲和素的磁珠,以清除RNA酶,防止RNA的降解;2)将捕获探针P1在5’端用生物素进行标记;3)将清洗过的磁珠与适量经标记的捕获探针P1混合,通过生物素和亲和素的特异结合,使捕获探针P1包被在磁珠表面,4℃保存;4)将标本用TRIzol LS裂解;5)向步骤4)所得溶液中加入包被有捕获探针P1的磁珠,使捕获探针P1捕获SARS冠状病毒RNA;和6)用磁力架收集经步骤5)的溶液中的磁珠,洗涤后,将其溶于适量的DEPC水中,-80℃保存;其中捕获探针P1的序列为:5′-GTAGCCTGGTTAATGTGC-3’;所述标本选自患者的血清、血浆、唾液、尿液、脑脊液或呼吸道分泌物中的一种。  
摘要 本发明提供了一种SARS冠状病毒RNA的捕获方法。具体的是使用生物素标记的捕获探针与包被了亲和素的磁珠结合,通过捕获探针捕获标本中的靶RNA,再用磁力架收集,并洗涤。该捕获方法可去除标本中的蛋白质、非靶RNA和抑制PCR的物质,使靶RNA得到纯化;该方法可同时对靶RNA进行浓缩富集,起到提高靶RNA浓度的目的。此外,本发明还提供了一种双探针捕获方法。在用捕获探针捕获靶RNA前,用预杂交探针与样本中的靶RNA进行预杂交,打开靶RNA的二级结构,进一步提高捕获效率。本发明还提供了一种SARS冠状病毒RNA的RT-PCR检测方法,该方法采用上述捕获方法捕获靶RNA,可大大提高检测的敏感度,有利于对患者进行早期诊断。  
国际公布  
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