| 公开(公告)号 | CN1289681C |
| 公开(公告)日 | 2006.12.13 |
| 申请(专利)号 | CN03117329.2 |
| 申请日期 | 2003.02.20 |
| 专利名称 | 乙型肝炎病毒siRNA表达载体的构建以及抗病毒治疗应用 |
| 主分类号 | C12N15/86(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/86(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 重庆医科大学 |
| 发明(设计)人 | 黄爱龙;唐 霓;张秉强;闫 歌 |
| 地址 | 400010重庆市渝中区医学院路1号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 重庆;85 |
| 主权项 | 一种用于构建靶向乙型肝炎病毒的小干扰性RNA分子的表达载体，其特征在于该表达载体含有下述三对序列中的一对：(1)上游序列：5’-TCGAGCTCCAGTTCAGGAACAGTATTCGTACTGTTCCTGAACTGGAGTTTTT-3’下游序列：5’-CTAGAAAAACTCCAGTTCAGGAACAGTACGAATACTGTTCCTGAACTGGAGC-3’(2)上游序列：5’-TCGAGTCACCATACTGCACTCAGGTTCGCCTGAGTGCAGTATGGTGATTTTT-3’下游序列：5’-CTAGAAAAATCACCATACTGCACTCAGGCGAACCTGAGTGCAGTATGGTGAC-3’(3)上游序列：5’-TCGAGGCCAAGTCTGTACAGCATCTTCGGATGCTGTACAGACTTGGCTTTTT-3’下游序列：5’-CTAG AAA GCCAAGTCTGTACAGCATCCGAAGATGCTGTACAGACTTGGCC-3’。 |
| 摘要 | 乙型肝炎病毒siRNA表达载体的构建以及抗病毒治疗应用，本发明属基因工程技术领域。本发明根据siRNA的设计原则，分别选择HBV包膜蛋白(MS)编码区69nt-87nt，聚合酶(P)编码区708nt-726nt，核心蛋白(C)编码区2052nt-2070nt的核苷酸序列，设计相应的siRNA序列，用BLAST软件进行同源分析证实为HBV高度保守序列后，化学合成单链寡核苷酸，体外经退火形成双链DNA，与真核表达载体pTZU6+1连接，酶切鉴定和序列测定分析表明成功构建了三种靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因序列的siRNA表达载体。上述表达载体通过阳离子脂质体介导与HBV真核表达载体pHBV共转染肝癌细胞HepG2后，采用免疫荧光和Abbott实验均证实HBV siRNA具有较强抑制病毒复制和表达的作用。 |
| 国际公布 |
