抗血小板聚集、低免疫原性重组葡激酶突变体及其制备方法
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公开(公告)号
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CN1286974C
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公开(公告)日
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2006.11.29
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申请(专利)号
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CN200410016443.6
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申请日期
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2004.02.19
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专利名称
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抗血小板聚集、低免疫原性重组葡激酶突变体及其制备方法
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主分类号
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C12N9/70(2006.01)I
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分类号
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C12N9/70(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;A61K38/43(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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复旦大学
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发明(设计)人
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宋后燕;苏华波
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地址
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200433上海市邯郸路220号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海正旦专利代理有限公司
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代理人
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包兆宜
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种抗血小板聚集、低免疫原性重组葡激酶突变体，其特征在于，改变野生型Sak环状区1的34-37位氨基酸，将野生型Sak肽链的Asp33-Gly34-Lys35-Gly36替换为Asp33-Gly34-Arg35-Gly36，命名为DGR；或替换为Asp33-Gly34-Arg35-Gly36-Asp，命名为RL1。
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摘要
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本发明属生物技术领域，具体涉及一种抗血小板聚集、低免疫原性的重组葡激酶突变体和制备方法。本发明分析了重组葡激酶单体、微纤溶酶—葡激酶—微纤溶酶复合物晶体结构，设计了新型葡激酶突变体分子结构。通过PCR定点突变构建突变体基因后，与原核表达载体pLY-4重组，转化大肠杆菌，筛选高表达工程菌。经发酵扩增，破碎细菌，离心收集后，经二步法纯化，冻干得产品基本维持野生型葡激酶纤溶活性，能抑制血小板聚集，有显著的防治血栓形成的功能，且免疫原性显著降低。
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国际公布
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