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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:人重组组织因子的构建表达、纯化方法及其应用专利检索:专利号/专利人/发明人
    

人重组组织因子的构建表达、纯化方法及其应用

公开(公告)号 CN1284797C  
公开(公告)日 2006.11.15  
申请(专利)号 CN200510012414.7  
申请日期 2005.03.22  
专利名称 人重组组织因子的构建表达、纯化方法及其应用  
主分类号 C07K14/435(2006.01)I  
分类号 C07K14/435(2006.01)I;C07K14/475(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I;C12Q1/56(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 太原博奥特生物技术有限公司  
发明(设计)人 焦进安;赵 邑;郝建平;李晋川;谢 红;赵峰梅  
地址 030006山西省太原市师范街110号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 山西五维专利事务所有限公司  
代理人 李 毅  
国省代码 山西;14  
主权项 一种人重组组织因子,其核苷酸序列如图1所示,含有天然人组织因子跨膜部分和膜外部分的243个基酸残基,为缺失胞内区的截断型人重组组织因子recombinant human tissue factor,简称rhTF243,具有天然人组织因子的全部凝血活性。  
摘要 本发明涉及人重组组织因子的构建、表达和纯化方法及应用。从人胎盘中获取得到的TF基因片段与phoA质粒重组,构建质粒载体pTF243,转化到大肠杆菌MM294中,筛选得到工程菌株,接入培养基直接发酵表达,得到的菌液先使用Q-Sepharose Fast Flow基质离子交换层析,再通过TF单抗免疫亲和层析柱吸附洗脱,得到rhTF243蛋白。本发明中TF随培养基中磷的消耗而直接表达,不需增加诱导物和对蛋白质进行变性与复性,简化了发酵工艺,提高了表达率,采用TF单抗纯化rhTF243蛋白,不会受到不可逆损伤,获得rhTF243纯度95%以上,收率大于60%,制备的PT试剂稳定性和敏感性均得到了提高。  
国际公布  
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