公开(公告)号
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CN1723283A
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公开(公告)日
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2006.01.18
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申请(专利)号
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CN200480001950.0
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申请日期
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2004.01.07
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专利名称
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用于生产重组多克隆蛋白质的方法
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主分类号
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C12N15/10(2006.01)I
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分类号
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C12N15/10(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K16/00(2006.01)I;C07K14/705(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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2003.1.7 DK PA200300008;2003.1.7 US 60/438,403;2003.6.5 US 60/476,018
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申请(专利权)人
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西福根有限公司
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发明(设计)人
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J·S·豪鲁姆;F·C·维比尔格;V·W·柯尔基;J·莎伦;杨秋英
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地址
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丹麦灵比
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颁证日
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国际申请
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2004-01-07 PCT/DK2004/000001
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进入国家日期
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2005.07.07
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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程 泳
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国省代码
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丹麦;DK
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主权项
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产生细胞集合的方法,所述细胞集合适合作为重组多克隆生产型细胞系,所述方法包括:a)提供了载体文库,所述载体文库包含不同核酸序列的群体,其中各所述载体包括:1)单拷贝的独特核酸序列,所述核酸序列编码多克隆蛋白质的独特成员,所述多克隆蛋白质包含与特定抗原结合的不同成员;和2)一个或多个重组酶识别序列;b)将所述载体文库导入宿主细胞系,其中所述宿主细胞系的各单个细胞的基因组包含重组酶识别序列,所述重组酶识别序列位于其基因组的单个特异性位点,并与载体上的重组酶识别序列匹配。c)确保在所述细胞中存在一个或更多的重组酶,以使步骤(a)中的不同核酸序列位点特异性地整合到宿主细胞系的细胞中,其中所述一个或更多的重组酶是i)由导入了所述核酸序列的所述细胞表达的;ii)由步骤a中的载体有效地编码;iii)通过第二载体表达而提供;或iv)作为蛋白质提供给所述细胞;和d)选择细胞,所述细胞含有来自所述不同核酸序列的文库的整合的拷贝。
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摘要
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本发明涉及生产重组多克隆蛋白质组合物,特别是重组多克隆抗体组合物的方法。所述方法包括:获取用不同核酸序列的文库转染的细胞的集合,其中集合中每个细胞都由所述文库中的一个成员转染并且能够表达该成员,所述成员编码不同的结合特定抗原的多克隆蛋白质成员并且在所述集合的个体细胞基因组内位于相同的单一位点,其中所述核酸序列不是天然地与集合中所述细胞相联系。对所述细胞在适合于表达所述多克隆蛋白质的条件下进行培养,所述多克隆蛋白质从所述细胞或培养上清液中获得。所述核酸序列通过使用用于位点特异性整合的载体文库转染而导入细胞内。本发明方法适合用于生产重组多克隆抗体,因此可以得到优于血浆来源治疗性免疫球蛋白产物的替代品。
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国际公布
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2004-07-22 WO2004/061104 英
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