| 公开(公告)号 | CN1273585C |
| 公开(公告)日 | 2006.09.06 |
| 申请(专利)号 | CN200410089167.6 |
| 申请日期 | 2004.11.29 |
| 专利名称 | 细胞色素 P450BM-3 单加氧酶变体基因及其用途 |
| 主分类号 | C12N9/02(2006.01)I |
| 分类号 | C12N9/02(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12P17/10(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 浙江大学 |
| 发明(设计)人 | 梅乐和;李红梅;姚善泾 |
| 地址 | 310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 张法高 |
| 国省代码 | 浙江;33 |
| 主权项 | 一种细胞色素P450BM-3单加氧酶变体基因，其特征在于：通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM-3变体基因，该P450BM-3基因中的第168位的天冬氨酸的密码子GAT突变为天冬酰胺的密码子AAT，第225位的丙氨酸的密码子GCA突变为缬氨酸的密码子GTA，将第440位赖氨酸Lys的密码子AAA突变为天冬酰胺Asn的密码子AAT所得到的P450BM-3变体基因，该变体基因的核苷酸序列为SEQIDNo.1，并且编码细胞色素P450BM-3的单加氧酶。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3单加氧酶变体基因及其用途。它通过易错PCR技术介导的随机突变，筛选获得的P450BM-3变体基因，该P450BM-3基因中的第168位的天冬氨酸的密码子GAT突变为天冬酰胺的密码子AAT，第225位的丙氨酸的密码子GCA突变为缬氨酸的密码子GTA，将第440位赖氨酸的密码子AAA突变为天冬酰胺密码子AAT所得到的P450BM-3变体基因(Asp168→Asn，Ala225→Val，Lys440→Asn)P450BM-3。该变体基因序列为SEQ ID No.1核苷酸序列，并且编码细胞色素P450BM-3的单加氧酶。本发明创造了一种对吲哚具有更高催化活力的P450BM-3变体基因，该变体基因表达的突变酶能构催化吲哚生成染料靛蓝，与R.D.Schmid领导的科研小组获得的具有三个突变位点的P450BM-3(Phe87Val，Leul88Gln，Ala74Gly)变体酶相比较，在测定的一例中活性提高了1.9-2.4倍，为生物转化生产染料靛蓝提供了广阔的应用前景。 |
| 国际公布 |
