公开(公告)号
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CN1268639C
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公开(公告)日
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2006.08.09
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申请(专利)号
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CN97199682.2
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申请日期
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1997.11.14
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专利名称
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神经营养蛋白的纯化
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主分类号
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C07K14/475(2006.01)I
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分类号
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C07K14/475(2006.01)I;C07K14/48(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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1996.11.15 US 60/030,838;1997.5.29 US 60/047,855
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申请(专利权)人
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基因技术股份有限公司
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发明(设计)人
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L·E·伯顿;C·H·施梅尔策;J·T·贝克
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地址
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美国加利福尼亚州南旧金山DNA道1号
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颁证日
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国际申请
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1997-11-14 PCT/US1997/021068
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进入国家日期
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1999.05.13
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专利代理机构
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北京市柳沈律师事务所
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代理人
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巫肖南;张平元
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国省代码
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美国;US
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主权项
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一种从混合物中分离重组人神经营养蛋白或其基因工程形式的方法,该混合物含有其它蛋白以及重组人神经营养蛋白的变体,该变体可包括该神经营养蛋白的错折叠变体、蛋白水解加工不正确的变体或重组人神经营养蛋白的糖基化变体,该方法包括用疏水作用层析树脂从混合物的其它蛋白和神经营养蛋白变体中分离出神经营养蛋白,所述的分离过程包括将混合物加样到疏水作用层析树脂上并在能使重组人神经营养蛋白与变体分离的条件下用洗脱缓冲液将神经营养蛋白从树脂洗脱下来,其中,所述的加样到疏水作用层析树脂上的混合物的pH为5-8,盐浓度为0.5M-3M,所述的疏水作用层析树脂具有选自苯基,烷氧基,丙基,丁基,辛基和异戊基的官能基,所述的缓冲液的洗脱条件包括选自如下的条件:降低盐浓度,改变表面张力,增加相对极性有机溶剂和改变溶液的pH值。
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摘要
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本发明提供了大规模纯化适用于临床使用的神经营养蛋白(包括成熟NGF)的方法。该方法提供了从各种不需要的误加工、错折叠、糖基化或电荷形式中分离出神经营养蛋白的手段。另外本发明还提供了基本上不含这些变体的神经营养蛋白(包括成熟的NGF)组合物。
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国际公布
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1998-05-22 WO1998/021234 英
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