| 公开(公告)号 | CN1244691C |
| 公开(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申请(专利)号 | CN200410014095.9 |
| 申请日期 | 2004.02.18 |
| 专利名称 | 自体胸水上清培养TIL细胞的方法 |
| 主分类号 | C12N5/08(2006.01)I |
| 分类号 | C12N5/08(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 发明(设计)人 | 刘宝瑞;邹征云 |
| 地址 | 210008江苏省南京市中山路321号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 南京苏科专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 孙 鸥 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 自体胸水上清培养TIL细胞的方法，无菌收集癌性胸水，离心后保存上清，用淋巴细胞分离液分离下层细胞，去除下层细胞中的红细胞、坏死组织碎片，其特征在于(1)将上清留作培养基；(2)取下层细胞中的白膜层细胞至上清培养基培养；(3)12～24小时后，肿瘤细胞全部贴壁，悬浮的是TIL细胞；(4)将浓度在5×105/ml～1×106/ml的TIL细胞置于饱和湿度、5％二氧化碳孵箱内培养，温度控制在37℃内；(5)1天后，加入终浓度50～100ng/ml的OKT3、800～6000U/ml的IL-2、50～100ug/ml的PHA；(6)隔1～2天，加入含800～6000U/ml的IL-2的完全培养基进行培养。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种利用自体胸水上清进行TIL细胞的培养方法。本发明采用将收集的癌性胸水离心后保存上清，用作培养基，将下层细胞中的白膜层细胞至该上清培养基中培养，得悬浮的TIL细胞，再至孵箱内培养，1天后加入OKT3、IL-2、PHA等，1、2天再加入IL-2进行培养。本发明的实验数据表明该方法是可行的，与现有方法相比，某些方面相同，某些方面更优。而本发明却避免了现有方法使用人AB血清可能导致的乙肝、爱滋病等传染，体外培养时间过长所增加的污染机率，以及培养时间过长增加病人负担，延长治疗时间和成本增加等缺陷。 |
| 国际公布 |
