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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:牦牛血超氧化物歧化酶制备方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

牦牛血超氧化物歧化酶制备方法

公开(公告)号 CN1244694C  
公开(公告)日 2006.03.08  
申请(专利)号 CN00113802.2  
申请日期 2000.04.28  
专利名称 牛血化物歧化酶制备方法  
主分类号 C12N9/08(2006.01)I  
分类号 C12N9/08(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;A61K38/44(2006.01)I;A61K8/66(2006.01)I;A23L1/30(2006.01)I;A61P25/28(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 苏 普  
发明(设计)人 苏 普  
地址 730050甘肃省兰州市小西湖硷沟沿211号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 兰州中科华西专利代理有限公司  
代理人 王玉双  
国省代码 甘肃;62  
主权项 一种牦牛血超氧化物歧化酶的制备方法,其特征在于包括下述工艺步骤:①将牦牛血除去血浆得红血球,用红血球体积的2-4倍、0.5-1.5%的盐液清洗红血球2-6次,再往红血球内加入体积比为1∶(0.5-1.5)的水,搅拌后使其溶血;②将溶血液冷却至-4-4℃,搅拌加入溶血液体积的0.15-0.35倍、温度为至少-10℃、90-98%的醇和溶血液体积的0.1-0.2倍、90-98%的氯仿,混合搅拌,再加入溶血液体积的0.2倍的水稀释,离心去除杂蛋白,得蛋黄色上清液,测定其SOD总活力;③将乙醇相上清液升至室混,加入上清液体积的0.5-1.5倍的固体磷酸氢二钾溶解,静置分离得上清液,上相液含有氯仿、醇和少量盐,离心上相液得淡蓝色上清液;④将③步中最后的上清液冷却至至少0℃,边搅边加入上清液体积的0.5-1倍、温度为至少-10℃的丙酮,离心后得蓝绿色沉淀,然后往沉淀物中加入沉淀物体积的0.5-1.5倍的水溶解;溶解液放透析袋中相对于2.5mM、pH7.6的KH2PO4-K2HPO4缓冲液透析,离心透析液得淡绿色清液;⑤将淡绿色清液超滤即得牦牛血红胞超氧化物歧化酶。  
摘要 本发明涉及一种牦牛血超氧化物歧化酶及其提取纯化工艺和应用,所述的超氧化物歧化酶是将牦牛血经去血浆、洗涤、溶血、抽提去杂蛋白、分离、沉淀、透析、超滤浓缩后得到牦牛血SOD;本发明的酶总活力高达90万单位/l,平均酶比活为13000u/mg,本发明的工艺可减少SOD的酶总活损失,得率高、生产周期短、使用试剂省、操作简单;本发明可作药品、保健品和食品、化妆品添加剂用。  
国际公布  
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