公开(公告)号
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CN1737150A
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公开(公告)日
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2006.02.22
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申请(专利)号
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CN200510050844.8
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申请日期
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2005.07.22
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专利名称
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脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建
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主分类号
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C12N15/62(2006.01)I
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分类号
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C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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浙江大学
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发明(设计)人
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赵同峰;谷 卫;詹宇红;赵江佩
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地址
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310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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杭州求是专利事务所有限公司
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代理人
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赵杭丽;张法高
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的cDNA序列,其特征是:全长共567个bp,1-15bp编码肠激酶识别序列,16-108bp编码人GLP-1-A,序列长93bp,其中19-21bp将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子GCT突变为甘氨酸密码子GGT,109-153bp编码接头肽DNA序列,序列长45bp,154-564bp编码脂联素,序列长411bp,565-567bp为终止密码子,该融合基因cDNA序列见SEQIDNO1。
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摘要
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本发明公开了人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建方法。本发明运用PCR技术获得人脂联素和GLP-1-A编码基因,脂联素基因通过扩增脂联素球状域基因获得,通过将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子突变为甘氨酸密码子获得GLP-1-A编码基因,运用酶切技术,将GLP-1-A和脂联素编码基因定向克隆到表达载体,获得人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体,经转化蛋白表达细菌表达出了含肠激酶识别序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白,本发明为进一步研究其活性,测定融合蛋白上GLP-1-A半衰期,得到能促进胰岛β细胞分泌胰岛素、能改善胰岛素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。
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国际公布
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