公开(公告)号
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CN1242049C
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公开(公告)日
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2006.02.15
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申请(专利)号
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CN01129780.8
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申请日期
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2001.10.18
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专利名称
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一种生产抗癌药物工程菌的发酵方法
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主分类号
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C12N1/20(2006.01)I
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分类号
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C12N1/20(2006.01)I;A61K35/74(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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暨南大学
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发明(设计)人
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王一飞;张美英;钱垂文;李久香
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地址
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510632广东省广州市暨南大学生物医药研究开发基地
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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广州市红荔专利代理有限公司
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代理人
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刘兴耿
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种生产抗癌药物工程菌即DH5a-pBVnm23-H1的发酵方法,其特征是:A.按配制10L发酵液,发酵培养基配方重量百分比如下:酵母提取物(Yeastextract)0.30~3.0蛋白胨(Typtone)0.30~3.0氯化钠(Nacl)0.5~1.5葡萄糖(Glucose)0.30~5.0微量元素适量B.发酵工艺(1)菌种的加入量菌种的接种量为培养基溶液的5~15%,菌种的光密度为1~3;(2)工程菌生长和诱导表达的时间及温度工程菌发酵过程中,长菌温度为28~35℃,时间2~5小时,诱导表达的温度为39~45℃,时间3~7小时:(3)加糖时刻及方式选择加糖方式采取慢速加糖方式,加糖量为100~350g,且在0.5~3小时加完;(4)发酵液酸碱度调节采用酸碱自动平衡调节pH值,使pH值维持在6.5~7.5之间;(5)溶氧水平通过通气量与转速自动调节溶氧,维持在40%以上水平。
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摘要
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本发明是一种生产抗癌药物工程菌即DH5a-pBVnm23-H1的发酵方法研究。该法包括如下步骤:发酵培养基配方筛选和发酵工艺条件选定。配方包括酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖等组成,发酵工艺包括菌种的加入量及其最佳生长时期,工程菌生长和诱导表达的时间及温度、加糖时刻及方式选择,发酵液酸碱度的调节等。用本发明培养基配方及所建立的发酵工艺进行DH5a-pBVnm23-H1的发酵,具有菌体得率高、目标蛋白表达量高、时间短、成本低等特点。
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国际公布
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