公开(公告)号
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CN1240719C
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公开(公告)日
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2006.02.08
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申请(专利)号
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CN01105798.X
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申请日期
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2001.03.28
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专利名称
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一种新型双功能水蛭素及其制备方法和应用
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主分类号
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C07K14/815(2006.01)I
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分类号
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C07K14/815(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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复旦大学
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发明(设计)人
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宋后燕;汤其群;管瀚俊;莫 炜;顾银良
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地址
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200032上海市医学院路138号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海正旦专利代理有限公司
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代理人
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吴桂琴
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种新型重组双功能水蛭素,其特征在于将野生型水蛭素HV-1肽链的32-35位Ser32-Asp33-Gly34-Glu35替换为Arg32-Gly33-Asp34-Ser35,Asp53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Glu58-Ile59-Pro60-Glu61-Glu62-Tyr63-Leu64-Gln65替换为Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58-Ile59-Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66。
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摘要
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本发明属生物技术领域,具体涉及一种兼具抗凝血酶活性和抗血小板聚集活性的双功能水蛭素(Bifunctional RecombinantHirudin)的蛋白质结构和制备方法及其应用。根据对野生型水蛭素的结构及其生化特性的分析,设计了新型双功能水蛭素分子结构。化学合成突变体基因,然后与真核表达载体pPIC9K重组,转化甲醇营养型酵母GS115,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,离心收集上清液,经三步法纯化双功能水蛭素。所得产品冻干后,具有抗凝血酶活性并能显著抑制ADP诱导的血小板聚集,对于预防血栓性疾病的发生有明显的作用。
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国际公布
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