公开(公告)号
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CN1727361A
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公开(公告)日
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2006.02.01
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申请(专利)号
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CN200410050936.1
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申请日期
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2004.07.28
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专利名称
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重组人干扰素α1b的纯化工艺
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主分类号
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C07K14/56(2006.01)I
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分类号
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C07K14/56(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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深圳科兴生物工程股份有限公司
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发明(设计)人
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何 询;于德强;张 为
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地址
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518057广东省深圳市南山区科技工业园科技路13号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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深圳睿智专利事务所
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代理人
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陈鸿荫;周惠来
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎,以及目标蛋白的捕获、中间纯化和精制过程,其特征在于:所述目标蛋白的捕获过程采用扩张床吸附,中间纯化过程采用亲合层析,精制过程采用凝胶过滤。
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摘要
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一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎、扩张床吸附、亲合层析和凝胶过滤步骤。细菌破碎是在Tris-HCl缓冲液中进行;所述扩张床吸附步骤中,选用阴离子凝胶,缓冲体系选用pH值为7.4的Tris-HCl,并选用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脱液一步洗脱。所述亲和层析步骤中,选用α1b干扰素的单克隆抗体偶联的凝胶;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脱液采用0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc缓冲液。所述凝胶过滤步骤中,选用Sephacryl凝胶,缓冲体系选用PBS。采用本重组人干扰素α1b的纯化工艺,生产效率可以大大提高,生产成本则大大降低。
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国际公布
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