公开(公告)号
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CN1238506C
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公开(公告)日
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2006.01.25
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申请(专利)号
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CN200310106226.1
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申请日期
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2003.11.07
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专利名称
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用作畜禽疫苗佐剂的CpG DNA基因工程重组体
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主分类号
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C12N15/11(2006.01)I
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分类号
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C12N15/11(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I;A61K39/39(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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深圳市未来海洋科技发展有限公司
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发明(设计)人
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李光富;朱鸿飞
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地址
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210096广东省深圳市中心区福中一路江苏大厦30楼45号信箱
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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南京经纬专利商标代理有限公司
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代理人
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王之梓
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种能提高畜禽疫苗效价的用作畜禽疫苗佐剂的CpGDNA的基因工程重组体,其特征在于:该基因工程重组体是按如下步骤制备的,按照5’-GGTGCATCGATGCAGGGGGG-3’、5’-GGTGCGTCGATGCAGGGGGG-3’及5’-TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3’串联而成的目的DNA序列,合成其正链和负链,在合成的寡核苷酸末端加上能与线形载体末端相匹配的碱基序列,然后将如此得到的寡核苷酸片段、退火缓冲液及无菌重蒸水混合后,于90℃~100℃水浴中孵浴3分钟以上,自然冷却至室温,将由此形成的一个或多个这样的双链DNA片段插入线性载体的相应的酶切位点,最后,将其转化感受态大肠杆菌而得到的基因工程重组体。
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摘要
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本发明公开了一种能促进畜禽疫苗效价的用作畜禽疫苗佐剂的CpG DNA的基因工程重组体,该基因工程重组体是根据由序列为:5’----GGTGCATCGATGCAGGGGGG--3’、5’----GGTGCGTCGATGCAGGGGGG--3’及5’---TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT--3’串联而成的D19D282006目的片段DNA的序列,合成其寡核苷酸正链和负链合成其寡核苷酸正链和负链,在合成的寡核苷酸末端加上能与线形载体末端相匹配的碱基序列,然后将此寡核苷酸片段、退火缓冲液、及无菌重蒸水混合后,于90℃~100℃水浴中孵浴3分钟以上,自然冷却至室温,形成含D19D282006序列的DNA片段,此后将此DNA片段插入线性载体的相应的酶切位点,最后,将其转化感受态大肠杆菌而得到的基因工程重组体。本发明能提高CpG佐剂的效能,生产工艺简单,成本低廉,适合于大规模工业化生产。极大地降低了CpG ODN的生产成本。
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国际公布
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