公开(公告)号
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CN1238492C
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公开(公告)日
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2006.01.25
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申请(专利)号
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CN02108974.4
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申请日期
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2002.04.16
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专利名称
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酵母重组株及IFNα-2b干扰素的纯化方法
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主分类号
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C12N1/19(2006.01)I
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分类号
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C12N1/19(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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海南海梁生物高科技有限公司
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发明(设计)人
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梁国栋;周 鹏;夏中宁
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地址
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570216海南省海口市金盘工业区金盘路17号嘉海大厦三楼
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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海南;66
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主权项
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一种酵母重组株,其特征在于将克隆修饰去除了启始密码子ATG的人α-2b干扰素基因huIFN-2b插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游xhoI/xbaI位点,同时对相应载体删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala),构建成人α-2b干扰素分泌型表达载体huIFNα-2b/pGAPZα-A,转入毕赤氏酵母(Pichiapastoris)的菌株GS115,构建成分泌型人α-2b干扰素重组酵母工程菌株huIFNα-2b/pGAPZα-A/GS115。
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摘要
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本发明涉及分泌表达α-2b干扰素的酵母工程菌株IFNα-2b/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α-2b干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白α-2b干扰素不需要复性,其生物比活性可达到1.0×109单位/毫克蛋白,低毒副作用;在纯化过程中,不需要价值昂贵的单抗柱,即可从发酵液中提取获得纯度达95%以上的目标蛋白α-2b干扰素,降低了生产成本。
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国际公布
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