白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法
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公开(公告)号
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CN1233822C
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公开(公告)日
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2005.12.28
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申请(专利)号
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CN03152968.2
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申请日期
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2003.09.05
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专利名称
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白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法
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主分类号
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C12N5/08
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分类号
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C12N5/08;C12N15/79;C12N15/24;A61K38/20;A61P35/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学技术大学;山东省医学科学院基础医学研究所
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发明(设计)人
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田志刚;张 建;魏海明;张建华;孙 汭
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地址
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230026安徽省合肥市金寨路96号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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合肥华信专利商标事务所
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代理人
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余成俊
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国省代码
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安徽;34
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主权项
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白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株，其特征在于保藏号为CGMCCNo.0996的NK-92/IL-15细胞株。
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摘要
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本发明公开了一种白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法，该细胞株表型为CD56强阳性，CD16和CD3均为阴性，其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法，是将IL-15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体，构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL-15；利用脂质体转染NK-92细胞；在筛选培养基中加入Geneticin(G418)进行筛选；有限稀释克隆化细胞，以IL-15的依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL-15的活性，从中挑选出表达IL-15的阳性细胞克隆；将该克隆在20～100 活性单位的IL-15的完全α-MEM 培养基中进行扩增，得到具有临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿瘤。
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国际公布
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