公开(公告)号 | CN1230553C |
公开(公告)日 | 2005.12.07 |
申请(专利)号 | CN02144779.9 |
申请日期 | 2002.12.13 |
专利名称 | 新型抗肿瘤人参皂苷的制备方法 |
主分类号 | C12P33/00 |
分类号 | C12P33/00 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学院大连化学物理研究所 |
发明(设计)人 | 杨 凌;何克江;韩 蔚;吴 磊 |
地址 | 116023辽宁省大连市中山路457号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 |
代理人 | 张 晨 |
国省代码 | 辽宁;21 |
主权项 | 一种用酶水解人参二醇型皂苷制备3位羟基游离的低极性人参皂苷:20-O-β-D-木糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(s)-原人参二醇[20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol,简称Mx]、20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl20(S)-protopanaxadiol,简称C-Y]或20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl20(S)-protopanaxadiol,简称Mc]的方法,包括水解、产物收集和酶回收利用步骤,用蜗牛酶在缓冲液中分别选择性水解人参皂苷Rb3制备Mx,人参皂苷Rb2制备C-Y或人参皂苷Rc制备Mc,其特征在于:皂苷与蜗牛酶的重量比为1∶1~10∶1,温度为30~45℃,pH3.0~5.5,水解时间2小时~3天,产物收集方法是酶法或微生物发酵法:a)酶法收集酶反应沉淀物,制成悬浊液;乙酸乙酯萃取三次,合并乙酸乙酯液,减压回收乙酸乙酯后,收集的残余物即为Mx、C-Y或Mc;若原料为含有Rb3、Rb2和Rc的植物、植物提取物或植物培养液,所获粗产物还需经吸附树脂纯化;b)微生物发酵法用水饱和的正丁醇提取培养基三次,合并正丁醇提取液,活性炭去色除臭,减压浓缩回收正丁醇,残余物溶于乙酸乙酯并用硅胶柱层析和反相层析纯化后获Mx、C-Y或Mc。 |
摘要 | 本发明涉及酶解或微生物发酵水解人参皂苷制备3位羟基游离的低极性人参皂苷:20-O-β-D-木糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(s)-原人参二醇[20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol,简称Mx]、20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl 20(S)-protopanaxadiol,简称C-Y]和20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl 20(S)-protopanaxadiol,简称Mc]的方法,特别是涉及粗蜗牛酶水解制备方法。本发明中所用蜗牛酶酶活性高、选择性好、离子强度要求低、抗失活能力强、来源方便、价格低廉,用该酶制备Mx、C-Y或Mc工艺简单方便、成本低、回收率高,产品质量好,可以满足医药、化妆及功能食品领域的需求,应用和开发价值极大。 |
国际公布 |