公开(公告)号 | CN1710098A |
公开(公告)日 | 2005.12.21 |
申请(专利)号 | CN200410025199.X |
申请日期 | 2004.06.16 |
专利名称 | 一种检测拉米夫定耐药HBV DNA的方法及试剂盒 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 上海复星医学科技发展有限公司 |
发明(设计)人 | 何剑军;周 煜;夏 懿 |
地址 | 200233上海市宜山路1289号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海光华专利事务所 |
代理人 | 余明伟 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种检测拉米夫定耐药HBVDNA的方法,其特征在于使用以下多聚核苷酸:引物15’TGTATTCCCATCCCATCATCCT3’、引物25’ATGTTGTACAGATTTGGTCCC3’、引物35’TTGGCTTCCAGTACCACATCATC3’、引物45’CCCCAGTACCACATCATCA3’、引物55’CCCAGAACCACATCATCA3’、引物65’CCCAGTACCACATCATTCAC3’、引物75’CCCAGAACCACATCATTCAC3’、探针15’TCCTATGGGAGTGGGCCTCAG3’、探针25’CCATTTGTTCGGTGGTTCGTAG3’、探针35’ACCACATCATCAATATAACTGAAAGCC3’、或探针45’ACCACATCATCCACATAACTGAAAGC3’、或者与上述序列同源性大于75%的序列、或者上述所有序列的碱基互补序列,使用其中的任意一种或一种以上的组合。 |
摘要 | 本发明涉及一种检测HBV DNA的方法及其试剂盒,特别是涉及拉米夫定耐药性的检测。根据耐药相关两种主要的突变基因(YMDD突变为YVDD和YIDD)设计特异性突变检测引物和病毒特异性引物及公用的配套探针,或设计特异性突变检测探针和病毒特异性检测探针,分别在三个PCR管中通过相同的PCR程序对同一样本进行实时荧光检测。根据I反应管、V反应管检测Ct值分别与C反应管检测Ct值的差值(ΔCt-i=Ct-i-Ct-c,ΔCt-v=Ct-v-Ct-c),对临床样本中HBV病毒发生YVDD和YIDD耐药突变情况进行判断。本发明的试剂盒性能稳定、灵敏度高于测序,能更精确判断耐药和敏感病毒的共存比例关系,适用于对耐药病毒和总病毒数量关系进行半定量分析。 |
国际公布 |