| 公开(公告)号 | CN1706937A |
| 公开(公告)日 | 2005.12.14 |
| 申请(专利)号 | CN200410020708.X |
| 申请日期 | 2004.06.09 |
| 专利名称 | 一种海绵细胞的微载体三维培养方法 |
| 主分类号 | C12N5/06 |
| 分类号 | C12N5/06;C12N11/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 发明(设计)人 | 张 卫;赵权宇;虞星炬;金美芳 |
| 地址 | 116023辽宁省大连市中山路457号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 |
| 代理人 | 许宗富;周秀梅 |
| 国省代码 | 辽宁;21 |
| 主权项 | 一种海绵细胞的微载体三维培养方法，其特征在于：1)在改进人工海水中接种微载体和海绵细胞进行培养；改进人工海水的水溶液中包括：Na+300～500mM，SO42-5.0～10.0mM，HCO3-0.1～0.5mM，K+5.0～15.0mM，TrisHCl10.0～30.0mM，Cl-300～500mM，Mg2+20～60mM，Ca2+5.0～20mM，SiO32-5～150μM，Fe3+30～120μM，Zn2+0.5～4μM，C6H5O73-30～120μM，pH7.6～8.2，PHA的重量浓度为5～2.5％；2)在海绵细胞培养5～8天后，向上述改进人工海水中添加有机碳源、有机氮源和维生素C，使它们的浓度分别为5～20μM，形成新的培养液体系；3)在步骤2)之后，每隔2～3天更换培养液体积的50～80％，用改进的人工海水替换并添加有机碳源和氮源使其最终浓度达到20～50μM，添加维生素C使其最终浓度达到10～20μM，在此条件下海绵细胞能进行正常生长。 |
| 摘要 | 本发明涉及海洋无脊椎动物细胞的培养，具体地说是一种海绵细胞的微载体三维培养方法；1)在改进人工海水中接种微载体和海绵细胞进行培养；改进人工海水的水溶液中包括：Na+，SO42-，HCO3-，K+，Tris HCl，Cl-，Mg2+，Ca2+，SiO32-，Fe3+，Zn2+，C6H5O73-，pH 7.6～8.2，PHA；2)在海绵细胞培养5～8天后，向上述改进人工海水中添加有机碳源、有机氮源和维生素C，形成新的培养液体系；3)在步骤2)之后，每隔2～3天更换培养液，并添加有机碳源和氮源，维生素C，在此条件下海绵细胞能进行正常生长。本发明优点为：可大规模生产药源，可选材料更广泛，应用前景好。 |
| 国际公布 |
