| 公开(公告)号 | CN1706944A |
| 公开(公告)日 | 2005.12.14 |
| 申请(专利)号 | CN200410055547.8 |
| 申请日期 | 2004.08.04 |
| 专利名称 | 重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定方法 |
| 主分类号 | C12N15/12 |
| 分类号 | C12N15/12;C12N15/70;C12N15/62;C07K14/435;C07K1/14;G01N33/68;A61K38/17;A61P9/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 2004.6.4 CN 200410044916.3 |
| 申请(专利权)人 | 南京大学 |
| 发明(设计)人 | 刘建宁;孙自勇;朱镇华;张 菁;张 巍 |
| 地址 | 210093江苏省南京市汉口路22号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 南京天华专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 夏 平 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 一种重组人脑钠素在大肠杆菌中的表达、纯化、鉴定方法，其特征在于：a.在DNA水平，将人脑钠素双链DNA双酶切产物与经过双酶切消化的表达质粒pET32a连接，该连接产物用大肠杆菌表达系统表达制备成硫氧还蛋白-脑钠素融合蛋白，该硫氧还蛋白-脑钠素融合蛋白中的脑钠素为重组人脑钠素；b.将表达制备成的硫氧还蛋白-脑钠素融合蛋白经肠激酶酶解处理后，酶解产物中的硫氧还蛋白以及少量未被酶解的硫氧还蛋白-脑钠素融合蛋白被吸附到Zn-Sepharose亲和柱上，硫氧还蛋白-脑钠素融合蛋白中的重组人脑钠素留存于样品穿过液中；c.用兔胸主动脉条的血管舒张效应测定上述重组人脑钠素的生物活性。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种治疗充血型心衰竭的多肽药物的表达、纯化及鉴定方法，属于生物技术制药中的基因工程生产多肽药物的技术领域。其目的是制备多肽药物重组人脑钠素(rhBNP)，用于治疗充血型心衰竭。重组人脑钠素(rhBNP)是用基因工程方法生产的多肽，利用硫氧还蛋白融合表达系统高效表达，经分离纯化获得目标多肽。体外活性测定结果表明，制备的重组人脑钠素(rhBNP)样品对兔胸主动脉条具有显著的血管舒张效应，具有和标准品相似的比活性。 |
| 国际公布 |
