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检测HBV复制和测试药物敏感性的方法

公开(公告)号 CN1701124A  
公开(公告)日 2005.11.23  
申请(专利)号 CN03824462.4  
申请日期 2003.09.26  
专利名称 检测HBV复制和测试药物敏感性的方法  
主分类号 C12Q1/70  
分类号 C12Q1/70  
分案原申请号  
优先权 2002.9.27 EP 02356188.9  
申请(专利权)人 国家健康医学研究所  
发明(设计)人 D·迪朗泰尔;S·迪朗泰尔;C·特雷波;F·祖里姆  
地址 法国巴黎  
颁证日  
国际申请 2003-09-26 PCT/EP2003/012398  
进入国家日期 2005.04.21  
专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所  
代理人 程 泳  
国省代码 法国;FR  
主权项 可能存在药物产品优选地抗病毒剂的情况下,用于测量HBV复制能力的方法,所述HBV例如为存在于生物样品中的HBV,该方法包括:(a)可能地提取包含在生物样品中的核酸;(b)使用至少两对引物进行PCR以扩增HBV核酸,所选的所述两对引物能够获得至少两个不同的HBV基因组扩增片段,这两个片段通过组装代表了一个线性连续的、能转录出pgRNA的DNA序列;(c)将由(b)中获得的片段克隆入载体,该片段处于异源启动子控制下,因此产生包含一段线性连续的、在所述启动子控制下的能转录出pgRNA的DNA序列的载体;(d)用所述载体转染或转导感受态细胞;(e)在允许从克隆的HBVDNA合成HBVpgRNA的条件下培养转染或转导的细胞;(f)可能地用药物产品特别是抗病药剂处理培养细胞;并且(g)可能地在药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下,根据病毒基因表达和/或病毒复制的情况确定HBV的复制能力。  
摘要 可能在有药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下,用于测量HBV复制能力的方法,例如存在于生物样品中的HBV。该方法包括:(a)可能地提取包含在生物样品中的核酸;(b)使用至少两对引物进行PCR以扩增HBV的核酸,所选的两对引物能够获得至少两个不同的HBV基因组扩增片段,这两个片段通过组装代表了一个线性连续的、能转录出pgRNA的DNA序列;(c)将由(b)中获得的片段克隆入载体,该片段处于异源启动予控制下,于是就产生一个包含一段线性连续的、在所述启动子控制下能转录出pgRNA的DNA序列的载体;(d)用所述载体转染或转导感受态细胞;(e)在允许从克隆的HBV DNA合成HBV pgRNA的条件下培养转染或转导的细胞;(f)可能地用药物产品特别是抗病毒剂处理培养细胞;并且(g)可能地在药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下,根据病毒基因表达和/或病毒复制的情况确定HBV的复制能力。  
国际公布 2004-04-08 WO2004/029301 英  
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