SARS病毒抗原S6-1的高特异性抗体的快速制备方法
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公开(公告)号
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CN1699421A
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公开(公告)日
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2005.11.23
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申请(专利)号
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CN200510026584.0
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申请日期
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2005.06.09
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专利名称
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SARS病毒抗原S6-1的高特异性抗体的快速制备方法
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主分类号
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C07K16/08
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分类号
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C07K16/08
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海大学
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发明(设计)人
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许政暟;宋任涛;许寅琦
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地址
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200444上海市宝山区上大路99号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海上大专利事务所
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代理人
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何文欣
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种SARS病毒抗原S6-1的抗体的快速制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：A.多克隆抗体的制备：a.融合SARS病毒抗原S6-1的TMV重组病毒的构建；b.抗原的制备：采用TMV-S6-1重组病毒的融合S6-1的CP制备抗原TMVCP-S6-1；c.将抗原TMVCP-S6-1免疫家兔，免疫后，抽取兔抗血清备用：B.通过交叉吸附实验获得高特异性抗体，具体步骤如下：a.制备交叉吸附需要的蛋白丙酮粉，制备蛋白丙酮粉的蛋白来源有两个：烟草总蛋白和野生型烟草花叶病毒外壳蛋白，分别得到烟草蛋白丙酮粉和野生型烟草花叶病毒外壳蛋蛋白丙酮粉；b.蛋白丙酮粉吸附兔抗血清，具体步骤如下：(1)取步骤A中c所得到的兔抗血清置入eppendorf管中，加入烟草蛋白丙酮粉均匀混合，烟草蛋白丙酮粉与兔抗血清的重量体积比为1∶50-1∶25；然后在冰上轻弹30min-45min，静置于冰箱内过夜；之后，于4℃下离心分离，将上清移至新的eppendorf管中，得到烟草蛋白丙酮粉处理后的抗体X；(2)取经过上述步骤(1)烟草蛋白丙酮粉处理后的抗体X置入eppendorf管中，加入野生型烟草花叶病毒外壳蛋蛋白丙酮粉均匀混合，野生型烟草花叶病毒外壳蛋蛋白丙酮粉与抗体的重量体积比为1∶50-1∶25；在冰上轻弹30min-45min，静置于冰箱内过夜；之后，于4℃下离心分离，将上清移至新的eppendorf管中，得到抗体Y；c.ProteinA亲和层析柱纯化抗体Y，得到抗体Anti-S6-1。
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摘要
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提供一种高特异性抗体快速制备的方法，包括融合外源序列的TMV CP-S6-1免疫动物得到多克隆抗体，使用烟草总蛋白和烟草花叶病毒外壳蛋白的蛋白丙酮粉多克隆抗体通过交叉吸附实验，并以蛋白A亲和层析柱为分离方式，然后做抗体的效果的免疫鉴定，属分子生物学及抗体制备技术领域。本发明的方法操作简单，经济快捷，重复性好，是一种准确并且易于普及推广的病毒抗原抗体的快速制备方法。
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国际公布
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