公开(公告)号
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CN1227361C
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公开(公告)日
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2005.11.16
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申请(专利)号
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CN02136310.2
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申请日期
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2002.07.30
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专利名称
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酵母表达胸腺肽α1的方法
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主分类号
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C12N15/16
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分类号
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C12N15/16;A61K38/32;A61P37/04;A61P31/12;A61P35/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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浙江大学药业有限公司
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发明(设计)人
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陈 智;陈 峰
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地址
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310029浙江省杭州市凯旋路268号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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浙江杭州金通专利事务所有限公司
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代理人
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吴巧玲
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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一种酵母表达胸腺肽α1的方法,该胸腺肽α1可用于因胸腺功能低下而造成的疾病的辅助治疗,其特征是该方法包括下列步骤:(1)以合成的胸腺肽α1为模板,设计5’GGAAGCTTACCATGGGCTCTGATGCTGCTGTTG3’上游引物和5’TATCTAGATTATGGATCCTAGTTCTCAGC3’下游引物,并在引物上引入HindIII酶切位点和BamHI酶切位点,通过PCR扩增法,得到含HindIII酶切位点和BamHI酶切位点的胸腺肽α1全长基因;(2)以HindIII酶和BamHI酶对胸腺肽α1PCR产物和pYES2质粒进行酶切,将双酶切后的胸腺肽α1PCR产物和pYES2质粒在T4连接酶作用下作连接反应,获得胸腺肽α1重组体;(3)将获得的胸腺肽α1重组体转化至啤酒酵母中,使其稳定表达人胸腺肽α1蛋白。
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摘要
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一种酵母表达胸腺肽α1的方法,是用PCR法扩增得到含HindⅢ酶切位点和BamHⅠ酶切位点的胸腺肽α1全长基因,经两端内切酶HindⅢ酶和BamHⅠ酶酶切后克隆至啤酒酵母中稳定表达,其表达的胸腺肽α1具有真核细胞的修饰基团,与人体内表达的胸腺肽α1结构一致,具有极好的生物学活性,可用于治疗肿瘤,抗病毒及免疫缺陷病人的辅助治疗及因胸腺功能低下而造成的疾病的辅助治疗,也可作为疫苗增强剂使用。还可直接口服,可用于口服制剂的开发。
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国际公布
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