减毒水痘-带状疱诊病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用
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公开(公告)号
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CN1227031C
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公开(公告)日
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2005.11.16
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申请(专利)号
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CN00133104.3
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申请日期
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1993.06.03
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专利名称
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减毒水痘-带状疱诊病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用
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主分类号
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A61K39/25
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分类号
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A61K39/25;C12N7/00
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分案原申请号
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93106673.5
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优先权
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1992.6.4 US 893295;1992.6.4 US 894039
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申请(专利权)人
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麦克公司
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发明(设计)人
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P·J·普罗沃斯特;D·L·克拉;P·A·弗里曼
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地址
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美国新泽西州
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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中国专利代理(香港)有限公司
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代理人
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谭明胜
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国省代码
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美国;US
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主权项
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减毒水痘-带状疱疹病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用，其中水痘-带状疱疹病毒缩写为VZV，所述减毒病毒是用如下方法制备的：a.培养选自人二倍体细胞的VZV易感染细胞，使之汇合成单层培养物，并供给不能脂代谢的二糖；b.在接近汇合点时，感染步骤a培养的细胞，得到高感染复数的VZV感染细胞；c.将VZV感染培养物在高营养状态下维持22-96小时，并在感染性VZV产量达到峰值时收集；d.在收集VZV感染细胞前，用含有或不含有溶酶体营养剂的生理溶液洗涤VZV感染培养物；e.将VZV感染细胞收集到稳定溶液中，并且或者立即破碎细胞，或者冷冻这些细胞供以后破碎；f.破碎VZV感染细胞以释放细胞结合的VZV，并除去细胞碎片，以提供无细胞VZV制备物；其中VZV易感染细胞是MRC-5细胞，减毒VZV是水痘-带状疱疹病毒的Oka株，培养温度是在30-37℃之间，二糖是以20-60mM提供的蔗糖，感染复数是1∶25和1∶625之间，溶酶体营养剂是以20-50mM提供的氯化铵或以230μM提供的氯喹。
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摘要
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以较高的VZV产量制备活的减毒水痘-带状疱疹病毒疫苗。该新方法使活VZV疫苗的大量制备更为实用。另外，最佳单层细胞培养条件提供了一种提高单层细胞密度的方法，该方法可用于提高病毒疫苗的产量。根据该方法，在常规培养容器中通常获得接近500，000个细胞/cm2的细胞密度。
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国际公布
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