公开(公告)号 | CN1683559A |
公开(公告)日 | 2005.10.19 |
申请(专利)号 | CN200510024103.2 |
申请日期 | 2005.02.28 |
专利名称 | 精神分裂症相关基因TTR的多态性位点及其应用 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 上海交通大学 |
发明(设计)人 | 贺林;杨异凤;万春玲;冯国鄞 |
地址 | 200240上海市闵行区东川路800号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海交达专利事务所 |
代理人 | 毛翠莹 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种检测转甲状腺蛋白TTR基因多态性位点的方法,其特征在于包括如下步骤:1)用常规酚氯仿方法从人的血液中提取DNA,浓度校正至10ng/μl,作为DNA模板;2)设计寡核苷酸引物序列,用聚合酶链式反应扩增,反应体系为15μl,其中20μM正/反向引物0.3μl,2mM脱氧核苷酸1.5μl,含20mM镁离子的缓冲液1.5μl,DNA聚合酶0.15μl及DNA模板1.0μl和灭菌双蒸水10.25μl,退火温度为53度,退火时间为1分钟,扩增32个循环,得到TTR基因外显子区域的DNA序列;3)对扩增后得到的DNA序列进行测序,测序反应总反应体积5μl,PEABI的BigDye3.1荧光标记的终止底物循环测序试剂混合物1μl,200ng基因组DNA,3.3pmol引物,循环参数:96℃,30s;50℃,30s;60℃,1min;循环30次,产物经乙酸钠/乙醇纯化后在DNA测序仪中进行自动测序,找出TTR基因外显子区域所有潜在的单核苷酸多态性位点。 |
摘要 | 本发明公开了一种与精神分裂症相关的基因TTR及其新发现的多态性位点,以及在检测精神分裂症方面的用途。本发明还提供了一种检测TTR基因的单核苷酸多态性的方法,并用上述方法在TTR基因的SEQ ID NO:1所示序列的第293位,SEQ ID NO:2所示序列的第224位、第265位、第322位和第352位检测到了四个新的单核苷酸多态性位点和一个9核苷酸缺失的位点。其中,位于第二号外显子293位的SNP1T→A的突变会造成氨基酸序列由谷氨酸到缬氨酸的改变,引起蛋白结构和功能的变化,等位位点A,即在其DNA互补链上为T等位位点,是产生精神分裂症的一个危险等位位点,其可应用于精神分裂症的诊断。 |
国际公布 |