新的基因工程抗体真核高效表达系统、其制备方法及其应用
公开(公告)号
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CN1220776C
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公开(公告)日
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2005.09.28
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申请(专利)号
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CN00108065.2
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申请日期
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2000.06.09
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专利名称
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新的基因工程抗体真核高效表达系统、其制备方法及其应用
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主分类号
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C12N15/79
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分类号
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C12N15/79;C12N15/13;C12N15/52;C12N15/54;C07K16/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所
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发明(设计)人
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杨治华;冉宇靓
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地址
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100021 北京市左安门外潘家园
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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永新专利商标代理有限公司
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代理人
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林晓红
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种制备基因工程抗体真核高效表达系统的方法,所述的方法包括分别制备抗体可变区基因克隆载体、抗体基因真核表达的中间表达载体及抗体真核高效表达载体以构成基因工程抗体真核高效表达系统,所述方法的特征在于:1)将选择标志基因和可扩增选择标志基因分别包括在抗体轻、重链表达载体中,2)在表达载体中同时采用弱化的启动子驱动选择标志基因和可扩增选择标志基因的表达,3)在表达载体中应用氨基酸序列为NH3-Met-Tyr-Phe-Ser-Ala-Ile-Val-Ser-Ala-Ser-Leu-Ser-COOH的肽作为抗体分泌信号肽,4)在表达载体中使用翻译型增强子序列,5)在表达载体中包括强启动子以驱动目的基因的表达,同时在表达载体中还包括人抗体恒定区基因组序列和强转录终止子。
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摘要
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本发明涉及一种制备基因工程抗体真核高效表达系统的方法,以及由此方法构建的一种基因工程抗体真核高效表达系统,称为pYR-GKES表达系统,包括8个独立的克隆载体和表达载体,本发明还涉及由该方法制备的表达系统在制备和高产量生产嵌合抗体、改形抗体、全人源化抗体、小分子抗体、胞内抗体、双特异性抗体及其它的类似物、突变物、合成物以及衍生物中的应用。
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国际公布
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