公开(公告)号
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CN1214041C
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公开(公告)日
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2005.08.10
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申请(专利)号
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CN98812969.8
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申请日期
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1998.11.26
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专利名称
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信号序列捕获方法
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主分类号
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C07K14/715
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分类号
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C07K14/715;C12N15/12;C12N5/16;C12Q1/68
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分案原申请号
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优先权
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1997.11.26 JP 324912/1997
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申请(专利权)人
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中外制药株式会社;北村俊雄
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发明(设计)人
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北村俊雄;小嶋哲郎
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地址
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日本东京都
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颁证日
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国际申请
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PCT/JP1998/005326 1998.11.26
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进入国家日期
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2000.07.06
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专利代理机构
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北京市柳沈律师事务所
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代理人
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巫肖南
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国省代码
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日本;JP
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主权项
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一种检测待测试的cDNA编码的肽是否具有分泌能力的方法,该方法包括:(a)将待测试cDNA与一种载体连接,所述载体含有(1)编码如下肽的DNA,所述肽选自缺失分泌信号区的mpl、GM-CSF受体的β链、EPO受体、c-kit受体、neu或FLT-3,和(2)位于该DNA的5’上游区的编码用于确定分泌能力的靶肽的cDNA克隆位点;(b)将(a)中制得的载体导入细胞中,和(c)培养(b)中制得的转化体,并检测细胞增殖能力。
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摘要
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一种编码缺乏分泌能力的人体mp1的DNA,它是通过去除稳态活性mp1的分泌信号和其胞外域主要部分制得的。该DNA与测试cDNA、编码已知分泌蛋白的cDNA和另一编码除去了分泌信号区域的相同蛋白的cDNA连接,所得每一种嵌合基因在细胞中表达以检查细胞增殖能力。在含作为测试cDNA的编码已知分泌蛋白的cDNA的细胞中检测到细胞增殖,然而对除去了分泌信号区域的编码相同蛋白的cDNA没有检测到细胞增殖。因此,通过构建cDNA文库并通过上面的方法筛选它,可以检测和分离编码包括I型膜蛋白和II型膜蛋白的分泌蛋白的cDNAs。
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国际公布
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WO1999/026978 日 1999.6.3
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