| 公开(公告)号 | CN1212392C |
| 公开(公告)日 | 2005.07.27 |
| 申请(专利)号 | CN03111900.X |
| 申请日期 | 2003.02.27 |
| 专利名称 | 一种以滤纸为唯一固体介质的粘细菌子实体规模制备方法 |
| 主分类号 | C12N1/20 |
| 分类号 | C12N1/20;C12M1/00;//(C12N1/20,C12R1:01) |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 山东大学 |
| 发明(设计)人 | 李越中;韩冠君;刘新利;胡玮;;扈锡涛 |
| 地址 | 250100 山东省济南市山大南路27号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 济南三达专利事务所 |
| 代理人 | 李健康 |
| 国省代码 | 山东;37 |
| 主权项 | 一种以滤纸为唯一固体介质的粘细菌子实体规模制备方法，实施步骤顺序如下：(1)发酵菌株的选择降解纤维素的粘细菌菌株中纤维堆囊菌(Sorangiumcellulosum)ATCC15384，ATCC25531，ATCC25569菌株之一；(2)粘细菌一级斜面种子的制备取上述菌株接种于固体斜面培养基上，30℃培养4～7天；培养基成分为：大豆蛋白胨5～15g/L，马铃薯淀粉15～25g/L，CaCl2.2H2O0.8～5g/L，MgSO4.7H2O0.7～4g/L，Fe-EDTA5～10mg/L，琼脂粉13～17g/L；(3)粘细菌二级种子液的制备取上述一级种子，接种于液体发酵培养基中，30℃，120转/分摇床培养5～7天；液体发酵培养基的成分为：地瓜淀粉15～35g/L，水解乳蛋白8～20g/L，CaCl2.2H2O0.8～5g/L，MgSO4.7H2O0.7～4g/L，Fe-EDTA5～10mg/L；(4)粘细菌子实体的培养制备将滤纸片弄皱褶后放入固体发酵器内，由滤纸片为碳源和固体介质，形成粘细菌生长所需的碳源和耗氧所需的孔隙支撑，将制成的粘细菌二级种子悬液接种在滤纸片上，通过喷头喷洒营养液，30℃通气静置培养10～15天；上述的培养是指在培养过程中用喷头向固体发酵器内以每小时喷洒pH为7.0～7.2的营养液5～10毫升的方法提供氮源、无机盐及微量元素，并保持滤纸片湿度；上述的营养液组成为：KNO30.5～0g/L；Na2HPO40.25～0.5g/L；MgSO4·7H2O0～2.0g/L；FeCl30.01～0.05g/L；琼脂0.5～2.0g/L；微量元素液0(V/V)；上述的营养液pH在灭菌前用KOH或HCl调整；(5)子实体的分离待粘细菌在滤纸片上较均匀地生成子实体后，收集滤纸片，分批放入盛有无菌水的子实体洗提器中，升温至80℃保持30-90分钟，搅拌，通过沸水洗提的方法将粘细菌形成的子实体从滤纸片上分离下来，即得粘细菌子实体。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种以滤纸为唯一固体介质的粘细菌子实体规模制备方法，它主要是通过粘细菌液体菌种的制备、专用固体培养装置发酵培养、子实体洗提装置水洗提取等工艺环节来大量获得粘细菌子实体。该工艺方法降低了成本，提高了效率，大大提高了工业化生产的可行性和可放大性。 |
| 国际公布 |
