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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:基因工程重组胸腺素α1的制备工艺专利检索:专利号/专利人/发明人
    

基因工程重组胸腺素α1的制备工艺

公开(公告)号 CN1641026A  
公开(公告)日 2005.07.20  
申请(专利)号 CN200410025834.4  
申请日期 2004.01.17  
专利名称 基因工程重组胸腺素α1的制备工艺  
主分类号 C12N15/16  
分类号 C12N15/16  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 党化宁  
发明(设计)人 党化宁  
地址 710118陕西省西安市高新技术产业开发区长安科技园西部大道66号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 西安新思维专利事务所有限公司  
代理人 黄秦芳  
国省代码 陕西;61  
主权项 基因工程重组胸腺素α1的制备工艺,其特征在于:它它依次包括下述步骤,(1)、重组Tα1基因工程菌的构建:按照大肠杆菌惯用密码子将Tα1的28个基酸转化为核苷酸序列,在其基因前依次设计上核酸内切酶EcoRI、蛋氨酸、内切酶BaomHI、天冬酰氨和甘氨酸对应的核苷酸序列;在其基因后依次设计上甘氨酸、核酸内切酶BglII、终止密码子和核酸内切酶PstI对应的核苷酸序列,采用克隆载体酶切后实现基因的串联EcoRIMetBamHIAsnGly——GlyBglIIStopPstIGAATTCATGGGATCCAACGGC——GGCAGATCTTGACTGCAG得到Tα1的n(2-8)串体,分别表示为Tα1①、Tα1②、Tα1③……Tα1其表达载体转化大肠杆菌得到基因工程菌;(2)对基因工程菌进行诱导表达;(3)基因工程菌的培养和高密度发酵;(4)融合蛋白的粗提、纯化和裂解:①所述粗提用高温骤冷方法;②所述纯化是层析方法;③所述裂解是用羟胺法进行裂解,裂解出天然Tα1单体。  
摘要 本发明涉及基因工程药物生物技术领域,具体涉及基因工程重组胸腺素α1的制备工艺。本发明要克服现有技术存在的成本高、价格昂贵,样品纯化复杂且污染环境的问题。它依次包括下述步骤,(1)重组胸腺素α1基因工程菌的构建:按照大肠杆菌惯用密码子将Tα1的28个氨基酸转化为核苷酸序列,在其基因前依次设计上核酸内切酶EcoRI、蛋氨酸、内切酶BamHI、天冬酰氨和甘氨酸对应的核苷酸序列;在其基因后依次设计上甘氨酸、核酸内切酶BglII、终止密码子和核酸内切酶PstI对应的核苷酸序列,采用酶切后实现基因的串联,得到Tα1的n(2-8)串体;(2)对基因工程菌进行诱导表达;(3)诱导基因工程菌的培养和高密度发酵;(4)融合蛋白的粗提、纯化和裂解;(5)胸腺素α1的纯化。  
国际公布  
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