公开(公告)号
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CN1636071A
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公开(公告)日
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2005.07.06
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申请(专利)号
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CN02812816.8
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申请日期
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2002.06.28
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专利名称
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细小病毒B19的诊断测试
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主分类号
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C12Q1/70
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分类号
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C12Q1/70
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分案原申请号
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优先权
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2001.6.28 US 60/302,077;2002.3.19 US 60/365,956;2002.3.29 US 60/369,224
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申请(专利权)人
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希龙公司
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发明(设计)人
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S·皮谢安特斯;V·夏玛拉
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地址
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美国加利福尼亚州
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颁证日
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国际申请
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PCT/US2002/020684 2002.6.28
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进入国家日期
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2003.12.26
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专利代理机构
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上海专利商标事务所有限公司
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代理人
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徐迅
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国省代码
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美国;US
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主权项
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一种检测生物学样品中人细小病毒B19感染的方法,其特征在于,该方法包括:(a)分离怀疑含有人细小病毒B19DNA的生物学样品中的核酸,其中,所述核酸含有RNA靶序列;(b)使分离得到的细小病毒B19核酸与第一寡核苷酸反应,该第一寡核苷酸含有第一引物,该第一引物含有与所述RNA靶序列的3′末端部分充分互补而能与其复合的复合序列,其中,所述第一引物还含有DNA依赖性RNA聚合酶5′的启动子,该启动子操作性连接于所述复合序列,所述反应在能形成寡核苷酸/靶序列复合物和启动DNA合成的条件下进行;(c)以所述RNA靶序列为模板,在延伸反应中使所述第一引物延伸,产生与所述RNA靶序列互补的第一DNA引物延伸产物;(d)用能选择性降解所述RNA靶序列的酶将所述第一DNA引物延伸产物从所述RNA靶序列中分离;(e)在形成寡核苷酸/靶序列复合物和启动DNA合成的条件下,用第二寡核苷酸处理所述DNA引物延伸产物,所述第二寡核苷酸含有第二引物,该第二引物含有与所述DNA引物延伸产物的3′末端部分充分互补而能与其复合的复合序列;(f)在DNA延伸反应中延伸所述第二引物的3′末端,产生第二DNA引物延伸产物,从而产生DNA依赖性RNA聚合酶的模板;(g)利用所述模板和能识别所述启动子序列的DNA依赖性RNA聚合酶产生所述靶序列的多个RNA拷贝;和(h)使用步骤(g)的RNA拷贝,自身催化性地重复步骤(b)到步骤(g),以扩增所述靶序列。
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摘要
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本发明公开了衍生自细小病毒B19基因组保守区的人细小病毒B19引物和探针。还公开了采用所述引物和探针的核酸试验。
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国际公布
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WO2003/002753 英 2003.1.9
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