| 公开(公告)号 | CN1206243C |
| 公开(公告)日 | 2005.06.15 |
| 申请(专利)号 | CN02103667.5 |
| 申请日期 | 2002.02.08 |
| 专利名称 | 猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体和抗原及其制备 |
| 主分类号 | C07K16/02 |
| 分类号 | C07K16/02;C07K14/17 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 |
| 发明(设计)人 | 王金洛;徐福州;杨兵;宋维平;;赖平安;秦泽云 |
| 地址 | 100089 北京市海淀区西郊板井 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 张涛;陆滨芊 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)卵黄抗体，其特征是该抗体是将分离自中国北京地区的TGEV病毒分离株作为人工抗原用于免疫非免疫产蛋鸡，收集该被免疫的鸡所产鸡蛋，从其蛋黄中提取的猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体；所述猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体的制备方法，包括以下步骤：1)TGEV抗原制备给仔猪口服所述TGEV病毒，攻毒后48小时出现重度腹泻时捕杀，取出小肠组织剪碎研磨，加0.01MPBS稀释，反复冻融，离心得到纯化病毒粒子；将该病毒粒子在猪睾丸(ST)细胞上增殖，收获细胞悬液，反复冻融三次后离心取上清液继续在细胞上盲传至第三代出现典型细胞病变；感染细胞上清液经冻融后离心，浓缩后用作抗原；上述浓缩抗原液，与弗氏完全佐剂乳化后作为首免用免疫原，与弗氏不完全佐剂乳化后作为二免、三免及四免用免疫原；2)免疫用上述制备的免疫原对非免疫产蛋鸡进行免疫，程序为：首免前5日注射“吸附百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素”进行免疫刺激，首免时注射免疫原1ml；2周后进行二免，注射免疫原1ml；再隔2周进行三免，注射免疫原2ml；再隔4周后进行第四次免疫，注射免疫原4ml；3)卵黄抗体分离提纯首免后6-14周收集所产鸡蛋，分离出卵黄，与等量PBS混合后匀浆，测定抗体效价，然后用聚乙二醇(PEG-6000)沉淀法提纯；所述用聚乙二醇(PEG-6000)沉淀法提纯的程序为：依次分别用3.5％PEG-6000、8.5％PEG-6000、12％PEG-6000对卵黄抗体沉淀3次，最后用预冷的50％乙醇进一步沉淀，得到卵黄抗体提纯物。 |
| 摘要 | 本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体和抗原及其制备方法。本发明将猪传染性胃肠炎病毒在猪睾丸细胞上增殖后作为免疫原，用于免疫非免疫蛋鸡，在收集卵黄并提纯的基础上获取了可用于治疗和预防猪传染性胃肠炎病毒的卵黄抗体。使用本发明的卵黄抗体治疗试验攻毒猪，试验组临床症状比对照组明显减轻，且试验组的死亡率显著低于对照组。将本发明提供的卵黄抗体在猪传染性胃肠炎高发病率的猪场实地应用，也产生了明显的预防和治疗作用。 |
| 国际公布 |
