公开(公告)号
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CN1620465A
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公开(公告)日
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2005.05.25
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申请(专利)号
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CN02828331.7
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申请日期
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2002.02.05
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专利名称
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重组胎盘生长因子的制备方法
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主分类号
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C07K14/475
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分类号
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C07K14/475;C12N15/12
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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盖莫纳股份公司
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发明(设计)人
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D·玛格里尼;M·巴缇斯特;E·康缇;G·萨尔维亚;M·图斯
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地址
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意大利阿纳尼
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颁证日
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国际申请
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PCT/IT2002/000065 2002.2.5
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进入国家日期
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2004.08.26
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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程泳
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国省代码
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意大利;IT
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主权项
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一种提取和纯化在修饰的原核细胞中的诱导型表达系统中表达的重组胎盘生长因子(PLGF)的方法,包括下列步骤:I)该原核细胞的发酵,II)内含体的提取和纯化,III)所表达蛋白的复性,IV)离子交换层析,V)反相层析,其特征在于实施步骤(I)直到培养基在600nm的光密度达到1至50(OD6001-50),随后诱导;步骤(II)包括裂解培养细胞,使DNA断裂和分离内含体;在步骤(III)中,内含体溶于变性缓冲液中并使表达蛋白至少部分恢复为二聚体形式;在步骤(IV)和(V)中,二聚体和多聚体形式的表达蛋白与单体形式分开并分离。
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摘要
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提取和纯化在诱导型原核表达系统中表达的重组胎盘生长因子(PLGF)的方法包括下列步骤:I)细菌细胞的发酵,II)内含体的提取和纯化,III)表达蛋白的复性,IV)离子交换层析,V)反相层析。
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国际公布
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WO2003/066676 英 2003.8.14
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