公开(公告)号 | CN1194094C |
公开(公告)日 | 2005.03.23 |
申请(专利)号 | CN03113968.X |
申请日期 | 2003.03.21 |
专利名称 | 酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法 |
主分类号 | C12N15/81 |
分类号 | C12N15/81;C07K14/435 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 暨南大学 |
发明(设计)人 | 谢琪璇;潘善培 |
地址 | 510632 广东省广州市天河区黄埔大道西601号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 广州华进联合专利商标代理有限公司 |
代理人 | 王东亮 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 一种酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法,采用受体菌GS115、目的蛋白基因及载体质粒、线性化酶等;包括的步骤有扩增目的蛋白的基因片段、重组质粒的构建、重组质粒的筛选和鉴定、重组质粒导入Pichiapastoris表达系统、重组子(工程菌)的筛选、重组蛋白的表达、重组蛋白的纯化,其特征是:所述目的蛋白基因是23~408位氨基酸的基因片段;所述的载体质粒是pPIC9k;所述重组质粒构建时,插入该载体质粒的ZP3目的基因片段是在前面引入了6个组氨酸序列的ZP323~408位氨基酸序列的基因片段;所述的重组质粒导入前,先将重组质粒用SacI酶进行线性化,然后从酵母基因组的AoxI基因处插入。 |
摘要 | 本发明公开了一种酵母菌表达系统中表达人卵透明带ZP3蛋白的方法,载体质粒为pPIC9k,目的蛋白选用了23~408位氨基酸,串联组氨酸序列片段连在目的蛋白的N末端,导入前采用SacI酶对重组质粒进行线性化。表达生成的ZP3蛋白分泌及溶解性好,便于应用。 |
国际公布 |