公开(公告)号
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CN1566346A
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公开(公告)日
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2005.01.19
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申请(专利)号
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CN03129330.1
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申请日期
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2003.06.18
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专利名称
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重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化
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主分类号
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C12N15/52
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分类号
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C12N15/52;C12N15/62;C07K19/00;C07K14/165
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学院上海生命科学研究院
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发明(设计)人
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姜卫红;杨晟;俞浩;谢幼华;汪垣;杨勇;张伟;郑华宝
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地址
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200031上海市岳阳路320号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海专利商标事务所
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代理人
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徐迅
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种制备重组SARS冠状病毒S蛋白或片段的方法,其特征在于,该方法包括步骤:(a)提供编码SARS冠状病毒S蛋白或片段的核苷酸序列,其中所述的核苷酸序列含有SEQIDNO:1中第751-1925位、2005-3410位、1-1925位、32-3659位或全长1-3768位的核苷酸序列;(b)将步骤(a)中的核苷酸序列插入表达载体;(c)将步骤(b)的表达载体转化宿主细胞,获得转化的宿主细胞;(d)在表达条件下,培养步骤(c)所述的宿主细胞,从而表达SARS冠状病毒S蛋白或片段;(e)分离纯化步骤(d)的SARS冠状病毒S蛋白或片段。
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摘要
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本发明提供了重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化。SARS病毒S蛋白基因被分段和完整地克隆到不同的细菌表达载体进行了表达。S蛋白基因751-1925bp、2005-3410bp、1-1925bp、32-3659bp片段及全长1-3768bp DNA都在大肠杆菌中实现了高效表达,表达量分别占菌体蛋白的35%、34%、24%、17%和5%,并经亲和层析得到了纯化。用本发明方法制备的重组S蛋白可用于临床诊治,疫苗制备和结构生物学研究。
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国际公布
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