公开(公告)号 | CN1193092C |
公开(公告)日 | 2005.03.16 |
申请(专利)号 | CN03116090.5 |
申请日期 | 2003.03.28 |
专利名称 | 骨髓间充质干细胞分离和体外扩增培养方法 |
主分类号 | C12N5/08 |
分类号 | C12N5/08 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 浙江大学;杭州大力神医疗器械有限公司 |
发明(设计)人 | 王金福 |
地址 | 310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 |
代理人 | 赵杭丽;张法高 |
国省代码 | 浙江;33 |
主权项 | 一种骨髓间充质干细胞分离和体外扩增培养方法,从骨髓中分离单核细胞,先进行细胞原代贴壁培养,再依据骨髓间充质干细胞表面标记抗原对贴壁细胞进行免疫抗体分选,其特征是:采用正、负向免疫分选结合的方法进行免疫抗体分选,纯化骨髓间充质干细胞,获得CD14-CD105+细胞,在体外培养体系中继代扩增培养,进行正、负向免疫分选纯化骨髓间充质干细胞的步骤为:第一步进行阴性免疫筛选,采用CD14标记磁珠分选,获得CD14-细胞,第二步进行阳性免疫筛选,采用CD105标记磁珠分选,获得CD14-CD105+细胞。 |
摘要 | 本发明提供了一种骨髓间充质干细胞分离和体外扩增培养方法。为了有效提高骨髓间充质干细胞的体外纯化率和扩增能力,在分离骨髓单核细胞的基础上,采用贴壁培养原代细胞后,再采用正、负向免疫分选结合的方法进行免疫抗体分选,纯化骨髓间充质干细胞,并在随后的纯化细胞扩增培养中,建立含有人参皂甙多糖的骨髓间充质干细胞培养体系,可提高骨髓间充质干细胞的体外扩增和继代培养能力,达到建立人骨髓间充质干细胞株系的目的。 |
国际公布 |