| 公开(公告)号 | CN1184327C |
| 公开(公告)日 | 2005.01.12 |
| 申请(专利)号 | CN02115903.3 |
| 申请日期 | 2002.05.30 |
| 专利名称 | 厌氧菌的一种快速检测方法 |
| 主分类号 | C12Q1/04 |
| 分类号 | C12Q1/04;C12Q1/37 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 华中科技大学同济医学院附属梨园医院 |
| 发明(设计)人 | 薛存宽;王模荣;蒋鹏;王玲 |
| 地址 | 430077 湖北省武汉市徐东路梨园新村 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 武汉开元专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 朱盛华 |
| 国省代码 | 湖北;42 |
| 主权项 | 厌氧菌的一种快速检测方法，其特征在于其具体步骤为：1)标本的预处理：(1)液体标本直接加饱和氯化钠成饱和溶液后盐析，(2)痰、脓粘稠标本，加浓度为2～10％的盐酸+次氯酸或酶震荡消化数分钟，充分溶解后，再加饱和氯化钠盐析，盐酸∶次氯酸＝1∶2～6，酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶，(3)组织块固体标本，先剪碎研磨成匀浆，再加2～10％盐酸+次氯酸或酶震荡消化成溶液，后加饱和氯化钠盐析，酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶，2)标本的固相微萃取：萃取针头采用有聚乙烯乙二醇/二乙烯苯、聚乙烯乙二醇/阴离子树脂或聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯复合涂层的针头，萃取方式采用密封瓶离取样液面1公分左右顶空萃取法，萃取1分钟以上，或液中萃取5分钟以上，3)相色谱分析：色谱柱——弹性石英毛细管色谱柱或填充柱，固定相为聚乙二醇20M和2-硝基对苯二甲酸的反应物，简称FFAP，载气——N2，检测器——氢火焰检测器或热导池类检测器，汽化室温度——200～250℃，脱附时间——5～10以上秒，柱温——90～150℃下恒温，为理想分离各成分峰，或在60～220℃分二阶或多阶程序升温，灵敏度——102～3mV.mL/mg，输出衰减倍数1/1～8，4)检测：采用定性检测，以明确、清晰检出以下成分峰为阳性，即有厌氧菌(1)明确、清晰检出有异丁酸、戊酸、异戊酸峰中之一者，(2)明确、清晰检出有乙酸、丙酸及另外一种短链脂肪酸峰中之一者，(3)明确、清晰检出有二种非异丁酸、戊酸、异戊酸、乙酸、丙酸的短链脂肪峰者。 |
| 摘要 | 厌氧菌的一种快速检测方法，涉及一种厌氧菌感染的诊断方法。其具体步骤为：标本的预处理，标本的固相微萃取(SPME)，气相色谱分析，由检测出的厌氧菌代谢产生的挥发性短链脂肪酸成分峰，诊断出厌氧菌的存在。采用本发明，标本采集无特殊要求，标本保送无特殊条件要求及时间限制，不需培养，可以快速检测出患者是否感染有厌氧菌，检测时间仅需30～40分钟。本发明不受正常寄居菌的影响，检测阳性率高，检测可靠。不仅可用于厌氧菌的检测，而且可用于病情监测，对厌氧菌感染性疾病的诊治有很高价值。 |
| 国际公布 |
