公开(公告)号 | CN1563377A |
公开(公告)日 | 2005.01.12 |
申请(专利)号 | CN200410017218.4 |
申请日期 | 2004.03.25 |
专利名称 | 一种获得目的mRNA的方法 |
主分类号 | C12N15/10 |
分类号 | C12N15/10;C12N15/70;C12N15/66;C12Q1/68;G01N33/50 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 华东理工大学 |
发明(设计)人 | 杨忠;赵建龙;马昱澍;肖君华;王锦之;魏东芝 |
地址 | 200237上海市梅陇路130号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 中原信达知识产权代理有限责任公司 |
代理人 | 罗大忱 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种获得目的mRNA的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:①在目的基因的3’末端引入oligo(dT)序列,构建表达载体;②表达载体转化到大肠杆菌中;③转化后的大肠杆菌总RNA提取;④mRNA从总RNA中的分离纯化;其中oligo(dT)的数目为20-40。 |
摘要 | 本发明提供了一种获得目的mRNA的方法。该方法是将目的基因进行改造,在其3’末端引入oligo(dT)序列,然后分别在5’端和3’端加上限制性内切酶识别序列,并与载体结合,转化到大肠杆菌感受态细胞中,促使其高表达,提取大肠杆菌的总RNA,然后用oligo(dT)纤维素进行分离纯化,获得所需的目的mRNA。本发明提供的方法,可以方便地获得高纯度的所需的mRNA片段,用于相关基因PCR检测试剂盒的开发。 |
国际公布 |