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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:利用三环葵烷-9-基-二硫代碳酸酯钾盐诱导血管内皮细胞向神经元分化的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

利用三环葵烷-9-基-二硫代碳酸酯钾盐诱导血管内皮细胞向神经元分化的方法

公开(公告)号 CN1560238A  
公开(公告)日 2005.01.05  
申请(专利)号 CN200410023498.X  
申请日期 2004.02.25  
专利名称 利用三环葵烷-9-基-二硫代碳酸酯钾盐诱导血管内皮细胞向神经元分化的方法  
主分类号 C12N5/08  
分类号 C12N5/08  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 山东大学  
发明(设计)人 苗俊英;张尚立;王楠  
地址 250100山东省济南市历下区山大南路27号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 济南三达专利事务所  
代理人 孙君  
国省代码 山东;37  
主权项 一种利用D609诱导血管内皮细胞向神经元分化的方法,由以下步骤组成:1)选取处于对数生长期的血管内皮细胞,接种于培养板各孔中的铺有明胶的盖玻片上,置于饱和湿度、5%的CO2、37℃培养箱内,在含有10%小牛血清和40μg/LbFGF的M199培养液中培养,至细胞生长达到盖玻片面积的80%~90%;2)用无血清培养液将上述培养板各孔中的细胞清洗1~2次,然后对培养板各孔中的细胞进行分组,确定对照组和诱导实验组,每组不少于4孔;3)对照组的血管内皮细胞培养液采用去除血清和和bFGF的M199培养基,诱导实验组的细胞培养液除使用对照组培养液外还添加了浓度为5mg/L~30mg/L的D609;4)分别调整上述对照组和诱导实验组血管内皮细胞的pH值,使pH为7.2,置于饱和湿度、5%的CO2、37℃培养箱培养20~30分钟;5)将步骤4)中对照组和诱导实验组血管内皮细胞pH调为7.4-7.8,置于饱和湿度、5%的CO2培养箱37℃培养,诱导6~11小时,检测诱导结果。  
摘要 本发明公开了一种利用D609诱导血管内皮细胞向神经元分化的方法,该方法由血管内皮细胞接种培养;无血清培养液清洗;对照组和诱导实验组血管内皮细胞在pH为7.2条件下预诱导;在浓度为5mg/L~30mg/L的D609,pH 7.4-7.8,饱和湿度、5%的CO2,37℃条件下诱导以及维持诱导等步骤组成。本发明方法证明了血管内皮细胞也具有多分化的潜能性,这为细胞的定向诱导分化提供了新的理论和实验依据,也为利用D609使其作为诱导剂诱导细胞分化开辟了新用途。  
国际公布  
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