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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:一种分离抗菌肽的方法与分离的抗菌肽专利检索:专利号/专利人/发明人
    

一种分离抗菌肽的方法与分离的抗菌肽

公开(公告)号 CN1557960A  
公开(公告)日 2004.12.29  
申请(专利)号 CN200410005199.3  
申请日期 2004.02.10  
专利名称 一种分离抗菌肽的方法与分离的抗菌肽  
主分类号 C12P21/02  
分类号 C12P21/02;C12N15/81;C12N15/62;C07K19/00  
分案原申请号  
优先权 2004.1.16 CN 200410015163.3  
申请(专利权)人 刘秋云;赫 然  
发明(设计)人 刘秋云;赫 然  
地址 510275广东省广州市新港西路中山大学生物工程研究中心  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 广州知友专利代理有限公司  
代理人 宣国华  
国省代码 广东;44  
主权项 一种分离抗菌肽的方法,其特征是利用高保真PCR构建酵母α交配因子前导肽与随机肽的融合DNA片段,用于随机肽的分泌表达;插入用EcoRI和XbaI双酶切的含有诱导型启动子的酿酵母载体;为避免未连接的线状DNA在转化后与酵母基因组DNA发生重组,用核酸外切酶III和绿豆芽核酸酶对其进行消化处理;纯化后电激转化酿酒酵母;转化子转接至棉子糖/半乳糖诱导表达平板,过夜生长后用含大肠杆菌菌种K12D31的上层培养基覆盖,观测抑菌圈;或用液体培养基诱导表达后测抑菌率;对阳性克隆进行PCR扩增,测序。  
摘要 本发明公开了一个分离抗菌肽的方法与抗菌肽,构建酵母α交配因子前导肽与随机肽的融合DNA片段,插入含有诱导型启动子的酿酒酵母载体,用核酸外切酶III和绿豆芽核酸酶消化未连接的线状DNA,纯化后电激转化酿酒酵母,转化子过夜生长后用含大肠杆菌菌种K12D31的上层培养基覆盖,观测抑菌圈。用液体培养基诱导表达后测抑菌率。对阳性克隆进行PCR扩增,测序。本发明方法能简单、高效地发现抗菌寡肽和多肽;这将为抗生素的发现开辟新途径。  
国际公布  
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