公开(公告)号
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CN1181066C
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公开(公告)日
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2004.12.22
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申请(专利)号
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CN02152157.3
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申请日期
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2002.12.03
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专利名称
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从红豆杉植物细胞培养液絮凝物中分离纯化紫杉醇的方法
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主分类号
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C07D305/14
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分类号
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C07D305/14
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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梅县梅雁生物工程研究所
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发明(设计)人
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王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明
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地址
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514787 广东省梅州市梅县嘉应西路梅雁工业大楼三楼
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种从红豆杉植物细胞培养液絮凝物中分离纯化紫杉醇的方法,其特征在于:(1)紫杉醇的红豆杉植物细胞培养液絮凝物用90~99%乙醇或甲醇室温浸提4~5次,每次浸提20~24小时,定时搅拌,减压抽滤,滤液合并减压回收乙醇或甲醇得流浸膏;(2)乙醇或甲醇提取得到的流浸膏直接进行硅胶柱层析,用正己烷洗脱除脂溶性杂质,用含5%~30%丙酮的正己烷梯度洗脱;(3)常压硅胶柱层析所得紫杉醇粗品,用薄层层析硅胶H10~40μm装的填低压柱层析,含3%-5%丙酮的二氯甲烷梯度洗脱紫杉醇;(4)低压柱层析所得紫杉醇用乙酸乙酯和正己烷混合溶剂体积比为1.6∶1进行重结晶。
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摘要
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本发明公开了一种从红豆杉植物细胞培养液絮凝物中分离纯化紫杉醇的方法。首先用90~99%乙醇或甲醇多次室温浸提絮凝物,乙醇或甲醇的提取物或将其进一步用二氯甲烷萃取所得产物,先后进行常压硅胶柱层析和薄层硅胶低压柱层析,柱层析所得紫杉醇用乙酸乙酯和正己烷或丙酮和正己烷混合溶剂多次重结晶,紫杉醇纯度达98.1%。由于红豆杉植物细胞培养液絮凝物体积相对细胞培养液体积小得多,却富集了细胞培养液中95~100%的紫杉醇,所以,从絮凝物中提取紫杉醇要比从细胞培养液中直接提取紫杉醇节省了大量有机溶剂、简化了分离过程、降低了成本、节省了提取紫杉醇的时间。
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国际公布
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