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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:一种改进的肝癌鼠源单克隆抗体的制备方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

一种改进的肝癌鼠源单克隆抗体的制备方法

公开(公告)号 CN1180080C  
公开(公告)日 2004.12.15  
申请(专利)号 CN02110583.9  
申请日期 2002.01.18  
专利名称 一种改进的肝癌源单克隆抗体的制备方法  
主分类号 C12N5/18  
分类号 C12N5/18;C12P21/08;C12Q3/00  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国科学院上海细胞生物学研究所  
发明(设计)人 李隽喆;谢弘;褚云芳;来文  
地址 200031 上海市岳阳路320号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 上海智信专利代理有限公司  
代理人 肖剑南  
国省代码 上海;31  
主权项 一种改进的肝癌鼠源单克隆抗体的制备方法,其特征在于,以改良型DXL无血清培养液为培养基质,采用填充床式生物反应器,高密度杂交瘤细胞连续培养法继以分离纯化制得,其中:所述改良型DXL无血清培养液是在DXL无血清、无蛋白培养液的基础上,添加了神经细胞生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子或胚胎生长因子中的一种或几种,各种生长因子的含量各为0.01-0.1毫克/升;所述DXL无血清、无蛋白培养液如下:腺嘌呤 0.1-0.5毫克/升丙酸 5-10毫克/升氯化铝 0.0005-0.001毫克/升偏钒酸铵 0.0005-0.001毫克/升精氨酸 100-500毫克/升天冬酰胺 10-50毫克/升天冬氨酸 5-30毫克/升氯化钡 0.001-0.005毫克/升生物素 0.05-0.5毫克/升氯化钙 10-100毫克/升氯化胆碱 10-100毫克/升硫酸铬钾 0.0005-0.005毫克/升柠檬酸 10-50毫克/升瓜氨酸 1-10毫克/升氯化钴 0.001-0.005毫克/升硫酸铜 0.001-0.01毫克/升半胱氨酸 10-100毫克/升双亚油酸卵磷脂 0.1-1毫克/升双硬脂酸卵磷脂 0.1-1毫克/升乙醇胺 1-10毫克/升乙二胺四乙酸盐 5-10毫克/升聚乙二醇 0.5-4毫克/升硫酸亚 0.5-5毫克/升原子铁 2-5毫克/升黄素腺嘌呤二核苷酸 0.01-0.05毫克/升叶酸 1-5毫克/升二化锗 0.0001-0.001毫克/升谷氨酸 10-50毫克/升谷氨酰胺 100-500毫克/升甘氨酸 1-10毫克/升葡萄糖 2000-10000毫克/升组氨酸 10-100毫克/升次黄嘌呤 1-10毫克/升异亮氨酸 100-500毫克/升亮氨酸 100-500毫克/升亚油酸 0.01-0.1毫克/升氯化锂 5-50毫克/升赖氨酸 50-500毫克/升氯化镁 50-500毫克/升氯化锰 0.00005-0.0005毫克/升甲硫氨酸 10-50毫克/升钼酸 0.00005-0.0005毫克/升MOPS 1000-10000毫克/升肌醇 10-50毫克/升烟酰胺 1-10毫克/升硝酸镍 0.0001-0.0005毫克/升鸟氨酸 1-10毫克/升草酰乙酸 1-10毫克/升泛酸 1-5毫克/升酚红 1-10毫克/升苯丙氨酸 10-100毫克/升溴化钾 0.00005-0.0005毫克/升氯化钾 100-500毫克/升碘化钾 0.00005-0.0005毫克/升脯氨酸 10-100毫克/升黄体酮 0.001-0.01毫克/升腐胺 0.1-0.5毫克/升吡哆辛 0.1-0.5毫克/升丙酮酸 100-500毫克/升核黄素 0.01-0.05毫克/升氯化铷 0.000005-0.00005毫克/升丝氨酸 10-100毫克/升氯化银 0.000001-0.0000 1毫克/升氯化钠  
摘要 本发明涉及一种改进的肝癌鼠源单克隆抗体的制备方法,本方法以改良型的DXL无血清培养液为培养基质,即在DXL无血清、无蛋白培养液中添加了各种生长因子,如神经细胞生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子或胚胎生长因子等,含量各为0.01-0.1毫克/升。采用填充床式生物反应器高密度杂交瘤细胞连续培养,工艺条件是,温度为30~40℃,转速为300-480RPM,pH为6.8~7.25,PO2为0.5-1.95巴,PCO2为0.5-1.95巴,PN2为0.5-1.95巴,空气流量为0.1-2/小时、压力为2-5巴。其细胞密度高达108/ml,每升培养液的单克隆抗体的得率达到1000-1500mg。  
国际公布  
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